tailieunhanh - Nghiên cứu tạo Panel DNA dùng kiểm định KIT PCR chẩn đoán vi khuẩn than và dịch hạch

Nghiên cứu này tiến hành tạo panel DNA dùng kiểm định kít PCR đa mồi chẩn đoán vi khuẩn than và dịch hạch. DNA được tách chiết từ các chủng than và dịch hạch được lưu giữ tại Học viện Quân y; chủng vi khuẩn E. coli, B. cereus được đặt mua tại công ty Microbiologies (Mỹ), | NGHIÊN CỨU TẠO PANEL DNA DÙNG KIỀM ĐỊNH KIT PCR CHẨN ĐOÁN VI KHUẦN THAN VÀ DỊCH HẠCH Trần Danh Khới1 TS. Nguyễn Thái Sơn2 TS. Lê Thu Hồng 2 1 Trưởng Đại học Kỹ thuật Y tế Hải Dương 2 Học viện Quân y TÓM TẮT Nghiên cứu này tiến hành tạo panel DNA dùng kiểm định kít PCR đa mồi chẩn đoàn VI khuẩn than và dịch hạch. DNA được tách chiết từ các chửng than và dịch hạch được lưu giữ tại Học viện Quân y chủng vi khuẩn E. coli B. cereus được đặt mua tại công ty Microbiologies Mỹ kế t quả đã tạo được bộ panel chứng Ơương DNA của than và dịch hạch bộ panel DNA chứng âm với 2 loài vi khuần rất gần về mặt di truyền là B. cereus và E. coli để kiểm tra phản ứng chéo đảnh giá độ đặc hiệu cùa phản ứng. Ngưỡng phất hiện cửa phẩn ứng chúng tôi xác định được ở mức 92fg ụl với DNA từ vi khuẩn than 131fg ụl với DNA từ VI khuẩn dịch hạch. Độ nhậy của bộ kít khi kiểm định đạt 100 với cả 6 cặp gen đích vrrÁ pagA capA của vi khuẩn than và ypo2088 plã cafa cùa vi khuần dịch hạch. Độ đặc hiệu của bộ kít khi kiểm định đạt 100 với 5 cặp gen đích pagA capA của vi khuẩn than và ypo2088 pla cafa của vi khuẩn dịch hạch riêng cặp gen vrrA của vi khuẩn than đã bắt dương tính 100 với nhiễm sắc thể của . Từ khóa Panel DNA Bacillus anthracis Yersinia pestis multiplex PCR. SUMMARY RESEARCH AND CREATE DNA PANELS EXAMINING THE QUANLITY OF PCR KITS FOR BACILLUS ANTHRACIS AND YERSINIA PESTIS DIAGNOSTICS This study was conducted to create DNA panels for examining the quality o f PCR-based for Bacillus anthracis and Yersinis pestis diagnostics. DNA was extracted from B. anthracis and Y. pestis which were kept at the Military Medical University. Echerichia coii and Bacillus cereus were obtained from Microbiologics inc. USA . This study has created the DNA positive control panels for B. anthracis and Y. pestis. A negative control DNA panel was created from B. cereus and E. coll the two closely related bacteria to B. anthracis and Y. pestis to check for cross-reactivity in assessing the specificity o f .