tailieunhanh - Phân biệt thịt bò, trâu, heo bằng kỹ thuật Multiplex Realtime PCR

Mục tiêu của nghiên cứu là tối ưu quy trình multiplex realtime PCR nhận diện DNA bò, trâu, heo, từ đó ứng dụng để phát hiện gian lận thương mại. Quy trình tối ưu có nồng độ mồi 200 nM và đoạn dò 100 nM (bò và trâu), nồng độ mồi 300 nM và đoạn dò 150 nM (heo); chu trình nhiệt 500C/2 phút, 950C/2 phút, 45 chu kỳ gồm biến tính ở 950C/15 giây và bắt cặp – kéo dài ở 600C/40 giây. Mời các bạn cùng tham khảo! | PHÂN BIỆT THỊT BÒ TRÂU HEO BẰNG KỸ THUẬT MULTIPLEX REALTIME PCR A MULTIPLEX REALTIME PCR METHOD TO DISCRIMINATE MEAT OF BEEF BUFFALO AND PORK Trần Minh Tấn1 Nguyễn Ngọc Tuân2 1 Chi cục Thú y vùng VI tại TP HCM 2 GV thỉnh giảng Bộ môn Thú y Viện Khoa học Ứng dụng trường ĐH Công nghệ TP HCM Email tranminhtan06@ nntttd@ TÓM TẮT Mục tiêu của nghiên cứu là tối ưu quy trình multiplex realtime PCR nhận diện DNA bò trâu heo từ đó ứng dụng để phát hiện gian lận thương mại. Quy trình tối ưu có nồng độ mồi 200 nM và đoạn dò 100 nM bò và trâu nồng độ mồi 300 nM và đoạn dò 150 nM heo chu trình nhiệt 500C 2 phút 950C 2 phút 45 chu kỳ gồm biến tính ở 950C 15 giây và bắt cặp kéo dài ở 600C 40 giây. Quy trình có độ nhạy và độ đặc hiệu cao giới hạn phát hiện của phương pháp đối với hỗn hợp mẫu thịt tươi và thịt đã xử lý nhiệt 80- 1200C 15 phút là 0 1 theo khối lượng hoặc 0 005 ng DNA phản ứng. Áp dụng quy trình để kiểm tra sản phẩm thịt chế biến trên thị trường đã phát hiện sự gian lận. Kết quả sơ bộ cho thấy 66 67 8 12 mẫu xúc xích bò chứa thịt trâu trong sản phẩm. Tất cả 12 mẫu bò viên được kiểm tra đều phát hiện DNA bò nhưng 66 67 mẫu lẫn thịt trâu và 16 67 mẫu lẫn thịt heo. Từ khóa DNA multiplex realtime PCR gian lận thịt bò-trâu-heo. 1. ĐẶT VẤN ĐỀ Xác định loài trong sản phẩm thịt là một lĩnh vực được phát triển nhanh chóng do có liên quan đến tôn giáo gian lận thương mại và sức khỏe người tiêu dùng. Trên thị trường nhiều sản phẩm thịt tươi và sản phẩm thịt chế biến không ghi đúng nhãn hiệu thành phần các loại thịt nhằm gian lận lừa dối người tiêu dùng để thu lợi bất chính. Theo các báo cáo trước đây khoảng 22 thịt và sản phẩm thịt chế biến ở Thổ Nhĩ Kỳ chứa loại thịt không được ghi trên nhãn 1 . Tại Thổ Nhĩ Kỳ mẫu xúc xích với nhãn ghi 5 thịt bò lại không phát hiện DNA bò trong sản phẩm và thịt bò viên ghi nhãn là thịt bò 100 lại phát hiện được thịt gà và gà tây 10 . Tháng 07 2016 Trung tâm giám định pháp y Sở Y tế TP. HCM thông báo kết quả giám định bò viên