tailieunhanh - Tách dòng và xác định trình tự gen SLO của vi khuẩn Streptococcus pyogenes được phân lập tại Việt Nam

Bài viết trình bày việc tiến hành tách dòng và xác định trình tự gen slo của vi khuẩn S. pyogenes được phân lập tại Việt Nam, để làm cơ sở cho nghiên cứu biểu hiện gen và sản xuất kháng nguyên SLO tái tổ hợp | Nghiên cứu khoa học công nghệ TÁCH DÒNG VÀ XÁC ĐỊNH TRÌNH TỰ GEN slo CỦA VI KHUẨN Streptococcus pyogenes ĐƯỢC PHÂN LẬP TẠI VIỆT NAM 1 1 VÕ VIẾT CƯỜNG PHẠM THỊ HÀ GIANG 1 2 NGUYỄN NHƯ NGHĨA NGUYỄN VĂN MINH 1. MỞ ĐẦU Streptococcus pyogenes thuộc liên cầu khuẩn nhóm A là một trong những tác nhân chính gây bệnh viêm đường hô hấp trên như viêm họng viêm amiđan. Theo ước tính hàng năm trên thế giới có khoảng 700 triệu trường hợp nhiễm liên cầu nhóm A phần lớn các trường hợp xảy ra ở trẻ em lứa tuổi 6 - 15 7 . Viêm họng do liên cầu có thể gây nên các biến chứng nguy hiểm gây tử vong cao như thấp tim thấp khớp viêm cầu thận hoặc để lại các di chứng ở van tim rất nặng ảnh hưởng đến khả năng lao động cũng như sức khỏe đến suốt đời 1 6 . Trong tế bào S. pyogenes protein SLO có trọng lượng phân tử khoảng 63 6 kDa gồm 571 axit amin trong đó 33 axit amin đầu là peptide tín hiệu signal peptide có chức năng định hướng SLO ra ngoài màng tế bào trình tự này bị cắt khỏi phân tử SLO trước khi tiết ra ngoài môi trường. Gen mã hóa cho kháng nguyên SLO gồm 1716 nucleotit được xác định trình tự lần đầu tiên vào năm 1987 4 . Trước đây SLO được sản xuất bằng cách nuôi S. pyogenes trong môi trường BHI sau đó kháng nguyên được tách chiết khỏi môi trường nuôi cấy bằng tủa phân đoạn với amoni sulfat tinh sạch bằng sắc ký trao đổi ion và sắc ký lọc gel. Phương pháp này thường tốn nhiều thời gian cho hiệu suất và độ sạch không cao 2 3 . Gần đây một số nghiên cứu sản xuất kháng nguyên SLO bằng công nghệ ADN tái tổ hợp đã được tiến hành trên các hệ biểu hiện E. coli Bacillus. Kháng nguyên SLO thương mại hiện nay cũng được sản xuất bằng con đường tái tổ hợp 2 5 . Trong nghiên cứu này chúng tôi tiến hành tách dòng và xác định trình tự gen slo của vi khuẩn S. pyogenes được phân lập tại Việt Nam để làm cơ sở cho nghiên cứu biểu hiện gen và sản xuất kháng nguyên SLO tái tổ hợp. 2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU . Nguyên vật liệu hóa chất - Chủng liên cầu khuẩn S. pyogenes ký hiệu Slo_B37 mang .

TỪ KHÓA LIÊN QUAN