tailieunhanh - Tối ưu điều kiện nuôi cấy biểu hiện protein kháng nguyên P102 tái tổ hợp của Mycoplasma hyopneumoniae trong E. coli BL21 (DE3)

Mục tiêu của nghiên cứu này là tối ưu điều kiện nuôi cấy bao gồm: Nhiệt độ cảm ứng, môi trường nuôi cấy, nồng độ Isopropulβ-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG), thời điểm cảm ứng và thời gian nuôi cấy sau cảm ứng IPTG để biểu hiện tốt hơn protein kháng nguyên P102 tái tổ hợp của Mycoplasma hyopneumoniae (Mh), tác nhân chính gây bệnh suyễn lợn trong tế bào E. coli BL21 (DE3). | HUAF JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCE amp TECHNOLOGY ISSN 2588-1256 Vol. 6 1 -2022 2826-2834 TỐI ƯU ĐIỀU KIỆN NUÔI CẤY BIỂU HIỆN PROTEIN KHÁNG NGUYÊN P102 TÁI TỔ HỢP CỦA MYCOPLASMA HYOPNEUMONIAE TRONG E. COLI BL21 DE3 Phùng Thăng Long Trường Đại học Nông Lâm Đại học Huế Tác giả liên hệ thanglong@ Nhận bài 26 09 2021 Hoàn thành phản biện 21 10 2021 Chấp nhận bài 29 10 2021 TÓM TẮT Mục tiêu của nghiên cứu này là tối ưu điều kiện nuôi cấy bao gồm nhiệt độ cảm ứng môi trường nuôi cấy nồng độ Isopropulβ-D-1-thiogalactopyranoside IPTG thời điểm cảm ứng và thời gian nuôi cấy sau cảm ứng IPTG để biểu hiện tốt hơn protein kháng nguyên P102 tái tổ hợp của Mycoplasma hyopneumoniae Mh tác nhân chính gây bệnh suyễn lợn trong tế bào E. coli BL21 DE3 . Kết quả nghiên cứu chỉ ra rằng protein kháng nguyên P102 tái tổ hợp của Mh biểu hiện mạnh nhất ở nhiệt độ cảm ứng 30 C trên môi trường YJ với nồng độ 0 6 mM IPTG mật độ quang OD600 đạt 0 8 và thời gian nuôi cấy sau cảm ứng là 6 giờ. Từ khóa Mycoplasma hyopneumoniae P102 Biểu hiện protein Protein tái tổ hợp OPTIMIZING CULTURE PARAMETERS FOR EXPRESSION OF RECOMBINANT P102 ANTIGEN PROTEIN FROM MYCOPLASMA HYOPNEUMONIAE IN E. COLI BL21 DE3 Phung Thang Long University of Agriculture and Forestry Hue University ABSTRACT The objective of this study was to optimize culture parameters including induction temperature culture media Isopropulβ-D-1-thiogalactopyranoside IPTG inducer concentration induction time and post-induction IPTG incubation time for better expression of recombinant P102 antigen protein from Mycoplasma hyopneumoniae Mh a causative agent of porcine enzootic pneumonia in E. coli BL21 DE3 . The results showed that the induction temperature at 30oC YJ medium IPTG concentration of mM induction time at optical density OD600 of and post-induction incubation time for 6 h were optimal for the expression of target protein of P102 in E. coli BL21 DE3 . Keywords .