tailieunhanh - Biểu hiện dung hợp gen mã hóa kháng thể đơn chuỗi tái tổ hợp nhận biết kháng nguyên nhóm máu với thioredoxin trong tế bào Escherichia coli

Trong nghiên cứu này, các tác giả công bố kết quả nghiên cứu biểu hiện kháng thể đơn chuỗi tái tổ hợp nhận biết kháng nguyên nhóm máu ở dạng tan khi dung hợp với thioredoxin trong vector biểu hiện pET32a(+). Protein dung hợp Trx/antiA-scFv đã được tổng hợp trong tế bào E. coli với kích thước phân tử 49 kDa và chiếm khoảng 40% ở dạng tan. Kết quả này tạo thuận lợi cho nghiên cứu tối ưu sự biểu hiện dạng tan, thuận lợi cho tinh chế và xác định hoạt tính của antiA-scFv tái tổ hợp. | Biểu hiện dung hợp gen mã hóa kháng thể đơn chuỗi tái tổ hợp nhận biết kháng nguyên nhóm máu với thioredoxin trong tế bào Escherichia coli TAP CHI SINH HOC 2019, 41(1): 45–52 DOI: EXPRESSION OF THE RECOMBINANT SINGLE CHAIN VARIABLE FRAGMENTS RECOGNIZING BLOOD ANTIGEN FUSED WITH THIOREDOXIN IN Escherichia coli Dang Thi Ngoc Ha, Le Thi Thu Hong*, Truong Nam Hai* 1 Institute of Biotechnology, VAST, Vietnam 2 Graduate University of Science and Technology, VAST, Vietnam Received 1 December 2017, accepted 2 February 2019 ABSTRACT The technology of recombinant single chain variable fragments (scFvs) expression has been used in research, diagnosis and treatment of diseases. In the previous study, we studied the expression of a recombinant single chain variable fragment recognizing blood A antigen (antiA-scFv) in E. coli. However, the protein was insoluble form resulting in difficulty for purification, refolding and activity assesment. Here, we present the study on fused expression of the recombinant scFv - specific blood A antigen with thioredoxin (Trx) in the expression vector pET32a(+). The results showed that the Trx/antiA-scFv fusion protein was expressed with molecular weight of 49 kDa in a soluble form reaching 40% of the total recombinant protein. This result facilitates the optimal condition of soluble protein expression, purification and bioactivity determination of the antiA- scFv recombinant antibody. Keywords: Escherichia coli, blood group A, single recombinant proteins, fusion expression, soluble protein, thioredoxin. Citation: Dang Thi Ngoc Ha, Le Thi Thu Hong, Truong Nam Hai, 2019. Expression of the recombinant single chain variable fragments recognizing blood antigen fused with thioredoxin in Escherichia coli. Tap chi Sinh hoc, 41(1): 45– 52. . * Corresponding author email: .