tailieunhanh - Cải thiện mức độ biểu hiện của gen NATC10 mã hóa nattokinase trong Bacillus subtilis BD170 tái tổ hợp

Nattokinase, một serine protease có trong sản phẩm Natto truyền thống của Nhật Bản, có khả năng làm tan đặc hiệu các sợi fibrin gây đông máu, rất có ích trong việc phân hủy huyết khối nội sinh ở người. Nghiên cứu này nhằm mục đích khảo sát các điều kiện nuôi cấy thích hợp để nâng cao mức độ biểu hiện của chủng Bacillus subtilis BD170 mang gen natC10 mã hóa nattokinase. | TẠP CHÍ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ Trường Đại học Khoa học ĐH Huế Tập 19 Số 2 2021 CẢI THIỆN MỨC ĐỘ BIỂU HIỆN CỦA GEN NATC10 MÃ HÓA NATTOKINASE TRONG BACILLUS SUBTILIS BD170 TÁI TỔ HỢP Tô Tuyết Trinh1 Đặng Thị Thùy Trang1 Phạm Tăng Phong1 Đoàn Phước Minh Đức1 Nguyễn Thị Anh Thư1 2 1 Khoa Sinh học Trường Đại học Khoa Học Đại học Huế 2 Trường Đại học Y- Dược Đại học Huế Email ntathu@ Ngày nhận bài 24 02 2021 ngày hoàn thành phản biện 6 3 2021 ngày duyệt đăng 02 11 2021 TÓM TẮT Nattokinase một serine protease có trong sản phẩm Natto truyền thống của Nhật Bản có khả năng làm tan đặc hiệu các sợi fibrin gây đông máu rất có ích trong việc phân hủy huyết khối nội sinh ở người. Nghiên cứu này nhằm mục đích khảo sát các điều kiện nuôi cấy thích hợp để nâng cao mức độ biểu hiện của chủng Bacillus subtilis BD170 mang gen natC10 mã hóa nattokinase. Các điều kiện nuôi cấy để biểu hiện gen đã được tối ưu bao gồm mật độ tế bào tại thời điểm cảm ứng tốc độ lắc nhiệt độ cảm ứng thời gian cảm ứng nồng độ chất cảm ứng và môi trường nuôi cấy. Mức độ biểu hiện cao nhất của gen natC10 được xác định ở nồng độ IPTG 1 2 mM 12 giờ sau khi cảm ứng ở 39 C tốc độ lắc 200 vòng phút với mật độ tế bào ở OD600 đạt giá trị 0 8 và khi được nuôi cấy trong môi trường LB lỏng. Từ khóa Bacillus subtilis nattokinase natC10 biểu hiện. 1. ĐẶT VẤN ĐỀ Đột quỵ não là bệnh lý mạch máu não nguy hiểm và phổ biến nhất hiện nay bởi nguyên nhân tử vong đứng hàng thứ 3 trên thế giới. Nguyên nhân chính là những cục máu đông chặn lưu lượng máu đến các tế bào não gây bệnh đột quỵ đó là căn bệnh rất nguy hiểm khó cấp cứu và chữa trị khả năng hồi phục sức khỏe như ban đầu là rất khó đa số bệnh nhân đột quỵ đều gặp phải những di chứng nặng nề ảnh hưởng đến cuộc sống và sinh hoạt của người bệnh tốn chi phí điều trị của gia đình và xã hội. Phân giải fibrin đóng vai trò quan trọng trong liệu pháp điều trị các bệnh tắc mạch máu. Do bản chất fibrin là các protein fibrin sẽ bị phân hủy bằng enzyme protease. Các .