tailieunhanh - Tạo dòng Escherichia coli biểu hiện Ribonuclease H tái tổ hợp từ Thermus thermophilus

Ribonuclease H thủy phân đặc hiệu liên kết phosphodiester của phân tử lai RNA-DNA. Thermus thermophilus RNase H được biểu hiện quá mức trong Escherichia coli dưới dạng protein tái tổ hợp sẽ tạo ra nguồn cung cấp enzym RNase H thể hiện được hoạt tính ở nhiệt độ cao và ít bị biến tính hay bất hoạt trong các điều kiện cực đoan. Tạo dòng Escherichia coli tái tổ hợp biểu hiện Ribonuclease H có nguồn gốc từ Thermus thermophilus. | Nghiên cứu Y Học TP. Hồ Chí Minh Tập 25 Số 2 2021 TẠO NG ESCHERICHIA COLI I U HIỆN I ONUCL H TÁI TỔ HỢP T THERMUS THERMOPHILUS Nguyễn Thị Linh Giang1 Phạ Nguyên Hoàng1 Hà Vi1 Vũ Thanh Thảo1 Trần Cát Đông1 TÓM TẮT Đặt vấn đề Ribonuclease H thủy phân đặc hiệu liên kết phosphodiester của phân tử lai RNA-DNA. Thermus thermophilus RNase H được biểu hiện uá mức trong Escherichia coli dưới dạng protein tái tổ hợp sẽ tạo ra nguồn cung cấp enzym RNase H thể hiện được hoạt tính ở nhiệt độ cao và ít bị biến tính hay bất hoạt trong các điều kiện cực đoan. Mục tiêu Tạo dòng Escherichia coli tái tổ hợp biểu hiện Ribonuclease H có nguồn gốc từ Thermus thermophilus. Đối tượng và Phương pháp nghiên cứu Plasmid được cấu trúc từ plasmid pET28b và đoạn gen RiboH từ Thermus thermophilus và biến nạp plasmid vào E. coli. Ribonuclease H được thu nhận và tinh chế bằng sắc kí trao đổi cation ua cột SP-sepharose. Kết quả Tạo dòng thành công chủng E. coli BL21 DE3 chứa plasmid được cảm ứng biểu hiện Ribonuclease H bằng IPTG. Lượng Ribonuclease H thu nhận được sau tinh chế bằng sắc ký trao đổi cation là 33 8 mg L dịch nuôi cấy. Hoạt tính thủy phân liên kết phosphodiester của RNase H tái tổ hợp được kiểm tra bằng cách ủ với phân tử lai RNA-DNA và kiểm tra sản phẩm cắt bằng điện di trên gel agarose. Kết luận Chủng E. coli mang plasmid tái tổ hợp có khả năng biểu hiện Ribonuclease H thể hiện được hoạt tính thủy phân đặc hiệu liên kết phosphodiester của phân tử lai RNA-DNA. Từ khóa Ribonuclease H Thermus thermophilus tái tổ hợp E. coli BL21 DE3 ABSTRACT CLONING AND EXPRESSION OF THERMUS THERMOPHILUS RIBONUCLEASE H IN ESCHERICHIA COLI Nguyen Thi Linh Giang Pham Nguyen Hoang Ha Vi Vu Thanh Thao Tran Cat Dong Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol. 25 - No. 2 - 2021 56 - 63 Background Ribonuclease H is an endoribonuclease that specifically hydrolyzes the phosphodiester bond of RNA-DNA hybrids. Thermus thermophilus RNase H was overexpressed in E. coli as a recombinant protein .

• Y khoa - Dược
• Nghiên cứu Y học
• Khoa học Dược
• Ribonuclease H
• Thermus thermophilus
• Tái tổ hợp
• Dòng Escherichia coli
• Nghiên cứu trong khoa học sức khỏe
• Thiết kế nghiên cứu Y học
• Loại thiết kế trong nghiên cứu Y học
• Thành phần thiết kế nghiên cứu Y học
• Triển khai thiết kế nghiên cứu Y học
• Quy trìnhthiết kế nghiên cứu Y học
• Ebook Phương pháp nghiên cứu y học
• Phương pháp nghiên cứu y học
• Phương pháp nghiên cứu
• Báo cáo khoa học
• Vấn đề nghiên cứu y học
• Bài giảng Phương pháp nghiên cứu khoa học
• Phương pháp nghiên cứu khoa học
• Đề cương nghiên cứu
• Phương pháp nghiên cứu khoa học y học
• Nghiên cứu khoa học y học
• Mẫu trong nghiên cứu y học
• Cỡ mẫu trong nghiên cứu y học
• Công thức tính cỡ mẫu y học
• Phương pháp chọn mẫu cơ bản trong y học
• Đạo đức trong nghiên cứu Y học
• Bài giảng Đạo đức trong nghiên cứu Y
• Đạo đức Y học
• Lịch sử đạo đức nghiên cứu
• Nguyên tắc đạo đức nghiên cứu
• Thỏa thuận tham gia nghiên cứu
• Đề tài y tế đảm bảo an toàn người bệnh
• Đề tài nghiên cứu khoa học y khoa
• Đề tài nghiên cứu khoa học
• Nghiên cứu khoa học
• Báo cáo nghiên cứu khoa học
• Nghiên cứu y sinh học
• Nguyên tắc cơ bản của đạo đức
• Hội đồng đạo đức nghiên cứu
• Bài giảng Nghiên cứu khoa học
• Kế hoạch nghiên cứu khoa học
• Các bước nghiên cứu khoa học
• Tiến hành nghiên cứu khoa học
• Các loại nghiên cứu khoa học
• Thiết kế nghiên cứu khoa học
• Mục lục bài viết Tạp chí nghiên cứu Y học
• Mục lục bài viết
• Tạp chí nghiên cứu Y học
• Tạp chí Y học
• Báo cáo xây dựng hệ thống y tế
• Nghiên cứu viên
• Nghiên cứu viên chính
• Trách nhiệm của nghiên cứu viên chính
• Chuyên môn của nghiên cứu viên
• Phương pháp chọn mẫu
• Nghiên cứu Dịch tễ học
• Nhân học y tế ứng dụng
• Nhân học y tế
• Bài giảng nhân học y tế
• Y tế công cộng
• Nghiên cứu định tính
• y học phổ thông
• y học thực hành
• kiến thức y học
• chuyên ngành y học
• tài liệu y học
• chuyên ngành y khoa
• bệnh thường gặp
• Trung y học khái luận
• Y học phương Đông
• Nghiên cứu Đông y
• Nghiên cứu Trung y
• Sách Đông y
• Y học cổ truyền
• Đề tài nghiên cứu
• Chuyên ngành y dược
• Danh mục đề tài
• y học dân tộc
• Y khoa trẻ em
• Khoa học y khoa trẻ em
• Cách viết đề tài nghiên cứu khoa học
• Khoa học môi trường
• Phương pháp nghiên cứu khoa học môi trường
• Phát triển kế hoạch nghiên cứu
• Hình thành ý tưởng nghiên cứu
• Nội dung hình thành ý tưởng
• Định hướng nghiên cứu
• Tạp chí Y Dược học
• Bài viết về y học
• Đại học Y dược Huế
• Hoạt động nghiên cứu khoa học sức khỏe
• giáo trình y học
• cẩm nang đông y
• chẩn trị đông y
• học thuyết đông y
• phép dưỡng sinh
• phương huyệt trị bệnh