tailieunhanh - Tinh sạch và xác định đặc điểm sinh hóa của RNA polymerase phụ thuộc RNA (RdRp) từ virus gây bệnh tay chân miệng (FMDV)

Bài viết này trình bày về protein RdRp tái tổ hợp của virus gây bệnh tay chân miệng (FMDV) đã được tinh sạch và kiểm tra các hoạt tính sinh hóa. Protein RdRp tái tổ hợp với độ tinh sạch hơn 98% đã được thu nhận và thể hiện hoạt tính RNA polymerase với sự tổng hợp RNA phụ thuộc mồi. Mời các bạn cùng tham khảo! | Tạp chí Khoa học và Công nghệ Số 44 2020 TINH SẠCH VÀ XÁC ĐỊNH ĐẶC ĐIỂM SINH HÓA CỦA RNA POLYMERASE PHỤ THUỘC RNA RdRp TỪ VIRUS GÂY BỆNH TAY-CHÂN-MIỆNG FMDV PHẠM TẤN VIỆT NGUYỄN NGỌC ẨN NGUYỄN THỊ DIỆU HẠNH Viện Công nghệ Sinh học và Thực phẩm Trường Đại học Công Nghiệp Tp. Hồ Chí Minh nguyenthidieuhanh@ Tóm tắt. Protein RdRp RNA dependent RNA polymerase của các virus có vai trò quan trọng trong chu trình sống của virus. Enzyme này được xem là mục tiêu cho các thuốc phòng ngừa và điều trị bệnh. Trong nghiên cứu này protein RdRp tái tổ hợp của gây bệnh tay chân miệng FMDV đã được tinh sạch và kiểm tra các hoạt tính sinh hóa. Protein RdRp tái tổ hợp với độ tinh sạch hơn 98 đã được thu nhận và thể hiện hoạt tính RNA polymerase với sự tổng hợp RNA phụ thuộc mồi. Chúng tôi đã xác định được giá trị km và V max cho sự tổng hợp UTP lần lượt là 13 6 µM và 42 µM giờ. kcat cho sự xúc tác phản ứng là 0 28 min-1 và kobs cho sự chuyển đổi cơ chất là 0 022 min-1. Chất ức chế cho hoạt động của enzyme DMUT cũng được kiểm tra và IC50 của DMUT là 26 79 µM. Như vậy đặc điểm sinh hóa của enzyme RdRp của FMDV đã được xác định đây là cơ sở cho việc sàng lọc các đối tượng thuốc trong phương pháp hóa trị liệu để phòng ngừa và điều trị bệnh tay chân miệng. Từ khóa. RNA polymerase phụ thuộc RNA virus gây bệnh tay chân miệng đặc điểm sinh hóa phương pháp so màu tinh sạch enzyme. PURIFICATION AND BIOCHEMICAL CHARACTERIZATION OF RNA- DEPENDENT RNA POLYMERASE RdRp FROM FOOT AND MOUTH DISEASE VIRUS Abstract. The RdRp protein RNA dependent RNA polymerase of the viruses plays an important role in the viral life cycle. This enzyme is considered an attractive target for viral preventive and treatment drugs. In this study the recombinant RdRp protein of foot and mouth disease virus FMDV was purified and examined biochemical activities. The recombinant RdRp protein with 98 purity were collected and expressed RNA polymerase activity with primer-dependent RNA synthesis. km and V max values are