tailieunhanh - Hoàn thiện kỹ thuật RT-qPCR để đánh giá mức độ biểu hiện MRNA của gen SPAG8

Sự điều hòa quá trình sinh trưởng và biệt hóa tinh trùng ở nam giới do nhiều gen quy định. Gen SPAG8 (Sperm associated antigen 8) là một trong những gen tham gia vào quá trình đó mà vai trò của nó còn chưa được minh chứng rõ ràng. Bài viết trình bày việc hoàn thiện quy trình kỹ thuật RT-qPCR (Revese transcription - quantitative polymerase chain reaction) để đánh giá mức độ biểu hiện mRNA của gen SPAG8 ở nam giới vô sinh. | JOURNAL OF COMMUNITY MEDICINE 2021 HOÀN THIỆN KỸ THUẬT RT-QPCR ĐỂ ĐÁNH GIÁ MỨC ĐỘ BIỂU HIỆN MRNA CỦA GEN SPAG8 Luyện Thị Thanh Nga1 Nguyễn Hoàng Việt1 Đoàn Thị Kim Phượng1 2 Đào Ngọc Bắc1 Đặng Đình Phúc Duy1 Trần Thị Huyền Trang1 Vũ Thị Hà1 2 TÓM TẮT technique in evaluating the mRNA expression level of Sự điều hòa quá trình sinh trưởng và biệt hóa tinh SPAG8 gene in blood samples from infertile males. trùng ở nam giới do nhiều gen quy định. Gen SPAG8 Material and methods total RNA from 50 Sperm associated antigen 8 là một trong những gen tham peripheral blood samples 25 samples of infertile males gia vào quá trình đó mà vai trò của nó còn chưa được minh 25 samples of control group were extracted. The mRNA chứng rõ ràng. expression level of SPAG8 gene were determined Mục tiêu Hoàn thiện quy trình kỹ thuật RT-qPCR using RT-qPCR assay. PCR products were tested by Revese transcription - quantitative polymerase chain electrophoresis on agarose gel 1 . reaction để đánh giá mức độ biểu hiện mRNA của gen Results 100 mRNA samples were extracted SPAG8 ở nam giới vô sinh. successfully from the peripheral blood samples with Đối tượng và phương pháp 50 mẫu máu ngoại vi accepted purity. cDNAs were synthesized successfully 25 mẫu của bệnh nhân vô sinh nam 25 mẫu của nhóm 100 from mRNA samples using reverse transcription chứng . Sử dụng kỹ thuật RT-qPCR để khảo sát biểu hiện technique. The quality of cDNA samples was examined mRNA của gen SPAG8 từ các mẫu bệnh phẩm kể trên. by agarose electrophoresis after the PCR amplification Kết quả 100 mẫu mRNA được tách chiết thành of GADPH. công từ máu ngoại vi với độ tinh sạch đạt chuẩn. 100 Conclusions All stages of RT-qPCR procedure cDNA được tổng hợp thành công từ mRNA bằng quá were completed each stage had its own criteria to trình sao mã ngược. Chất lượng cDNA được kiểm chứng control which ensured that the procedure works well the bằng hình ảnh điện di trên thạch agarose sau phản ứng results can be analyzed clearly. Consequently the .