Đang chuẩn bị liên kết để tải về tài liệu:
GIÁO TRÌNH : THỰC TẬP SINH HÓA part 3

2.3.1 Định lượng đường khử theo phương pháp Bertrand Nguyên tắc Trong môi trường kiềm các đường khử (glucose, fructose, maltose.) dễ dàng khử đồng II thành đồng I theo phản ứng Fehling. Kết tủa đồng I oxyt có màu đỏ gạch, có khả năng khử với muối Fe3+ thành muối Fe2+ trong môi trường acid: Cu2O + Fe2(SO4)3 + H2SO4 → 2CuSO4 + 2FeSO4 + H2O Fe2+ sinh ra có tính khử lại tác dụng với KMnO4 là chất oxy hóa nên dùng KMnO4 để chuẩn độ Fe2+ trong môi trường acid: 10FeSO4 + 2KMnO4 + 8H2SO4 → K2SO4. | Giáo Trình Thực Tập Sinh Hóa 2.3.1 Định lượng đường khử theo phương pháp Bertrand Nguyên tắc Trong môi trường kiềm các đường khử glucose fructose maltose. dễ dàng khử đồng II thành đồng I theo phản ứng Fehling. Kết tủa đồng I oxyt có màu đỏ gạch có khả năng khử với muối Fe3 thành muối Fe2 trong môi trường acid Cu2O Fe2 SO4 3 H2SO4 2CuSO4 2FeSO4 H2O Fe2 sinh ra có tính khử lại tác dụng với KMnO4 là chất oxy hóa nên dùng KMnO4 để chuẩn độ Fe2 trong môi trường acid 10FeSO4 2KMnO4 8H2SO4 K2SO4 2MnSO4 5Fe2 SO4 3 8 H2O Dựa vào lượng KMnO4 sử dụng ta có thể tính được lượng Cu2O và từ đó tính được lượng đường khử trong dung dịch bằng cách tra bảng tỉ lệ giữa dung dịch KMnO4 và đường khử của Bertrand. Hóa chất - Thuốc thử Fehling Fehling A Fehling B tỉ lệ 1 1 - Fehling A 40 g CuSO4.5H2O trong 1 lít nước cất - Fehling B 20g natri kali tartrate C4H4O6NaK.4H2O và 150g NaOH trong 1 lít nước cất. - Dung dịch Fe2 SO4 3 trong H2SO4 50g Fe2 SO4 3 và 20g H2SO4 thêm nước đến 1 lít. - Dung dịch KMnO4 1 30N. - Dung dịch acetate chì 30 - Dung dịch Na2SO4 bão hoà Tiến hành Chuẩn bị nguyên liệu Cân và cho vào cối sứ 5-10 gram nguyên liệu tươi nghiền nhỏ thêm khoảng 50ml nước cất vào bình tam giác 250 ml. Đem đun cách thủy ở 80oC trong 15 phút thỉnh thoảng lắc đều trong khi đun để chiết tách đường. Sau đó lấy ra để nguội đến nhiệt độ phòng. Tiến hành khử tạp chất bằng cách Thêm 7 mL dung dịch acetate chì 30 vào dịch chiết đường cho vào bình định mức 100mL lắc đều và để lắng 5 phút. Nếu thấy xuất hiện một lớp chất lỏng trong suốt ở bên trên lớp cặn thì việc khử tạp chất đã xong. Cho tiếp 20 mL dung dịch Na2SO4 bão hoà vào để loại chì thừa. Lắc đều và để tủa lắng xuống. Thêm nước cất vừa đủ đến vạch 100 mL lắc đều và lọc qua giấy lọc khô. Dịch lọc dùng để tiến hành định lượng. Tiến hành định lượng Cho 10 mL dung dịch đường cần khảo sát và 10mL thuốc thử Fehling vào bình tam giác 250 mL. Đậy bình bằng nút thủy tinh và đun trên bếp có lưới amiăng. Đun sôi khoảng 3 phút kết tủa đỏ xuất hịên .