tailieunhanh - GIÁO TRÌNH : THỰC TẬP SINH HÓA part 5

. KHÁI QUÁT VỀ ACID AMIN VÀ PROTEIN Protein là những hợp chất cao phân tử được cấu tạo từ các acid amin liên kết nhau bằng liên kết peptide. Khi thủy phân protein, ta thu được khoảng 20 loại acid amin. Protein có thể phân làm 2 loại: - Protein đơn giản: trong thành phần phân tử chỉ gồm các acid amin liên kết với nhau bằng liên kết peptide - Protein phức tạp: trong thành phần ngoài các acid amin còn có những hợp chất khác không phải acid amin . Protein có rất đa dạng. Tùy thuộc. | Giáo Trình Thực Tập Sinh Hóa CHƯƠNG 5. ACID AMIN VÀ PROTEIN . KHÁI QUÁT VỀ ACID AMIN VÀ PROTEIN Protein là những hợp chất cao phân tử được cấu tạo từ các acid amin liên kết nhau bằng liên kết peptide. Khi thủy phân protein ta thu được khoảng 20 loại acid amin. Protein có thể phân làm 2 loại - Protein đơn giản trong thành phần phân tử chỉ gồm các acid amin liên kết với nhau bằng liên kết peptide - Protein phức tạp trong thành phần ngoài các acid amin còn có những hợp chất khác không phải acid amin . Protein có rất đa dạng. Tùy thuộc vào các cấu trúc của chúng mà các tính chất lý hóa học sinh học của protein sẽ khác nhau. Để định tính và định lượng acid amin protein ta dùng phản ứng màu với nynhydrin và phản ứng Biuret. Để tách các acid amin khỏi hỗn hợp ta dùng phương pháp sắc ký trên giấy sắc ký trao đổi ion điện di. Gốc R khác nhau của acid amin sẽ cho những phản ứng màu riêng biệt của mỗi acid amin phản ứng xanthoproteic phản ứng millon. Phản ứng Biuret xác định liên kết peptide có trong phân tử protein. Khi đưa pH của dung dịch protein về điểm đẳng điện pI bằng dung dịch đệm thích hợp thì các protein bị trung hòa điện tích. Môi trường có pH gần bằng pI của protein thì protein sẽ bị kết tủa nhiều nhất. Do kích thước phân tử lớn nên protein không đi qua được các màng bán thấm. Dựa vào tính chất này người ta dùng phương pháp thẩm tích để loại muối và những phần tử nhỏ khác khỏi dung dịch protein. . PHÂN tích hỗn hợp acid AMIN BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ TRÊN GIẤY Nguyên tắc Trong những điều kiện thí nghiệm nhất định dung môi nhiệt độ loại giấy sắc ký độ bảo hòa của dung môi trong bình sắc ký. tốc độ di chuyển của các acid amin khác nhau thì khác nhau và đặc trưng bởi một hệ số Rf. Nhờ tính chất này sau khi sắc ký các acid amin trong hỗn hợp tách rời nhau. Sau đó dùng thuốc hiện màu thích hợp để nhận biết các acid amin. Hỗn hợp dung môi sắc ký là một hỗn hợp không trộn lẫn thường gồm nước và một vài dung môi hữu cơ khác. Trong đó nước có ái lực mạnh với giấy sắc .