Kinh doanh - Marketing
Kinh tế quản lý
Biểu mẫu - Văn bản
Tài chính - Ngân hàng
Công nghệ thông tin
Tiếng anh ngoại ngữ
Kĩ thuật công nghệ
Khoa học tự nhiên
Khoa học xã hội
Văn hóa nghệ thuật
Sức khỏe - Y tế
Văn bản luật
Nông Lâm Ngư
Kỹ năng mềm
Luận văn - Báo cáo
Giải trí - Thư giãn
Tài liệu phổ thông
Văn mẫu
Giới thiệu
Đăng ký
Đăng nhập
Tìm
Danh mục
Kinh doanh - Marketing
Kinh tế quản lý
Biểu mẫu - Văn bản
Tài chính - Ngân hàng
Công nghệ thông tin
Tiếng anh ngoại ngữ
Kĩ thuật công nghệ
Khoa học tự nhiên
Khoa học xã hội
Văn hóa nghệ thuật
Y tế sức khỏe
Văn bản luật
Nông lâm ngư
Kĩ năng mềm
Luận văn - Báo cáo
Giải trí - Thư giãn
Tài liệu phổ thông
Văn mẫu
Thông tin
Điều khoản sử dụng
Quy định bảo mật
Quy chế hoạt động
Chính sách bản quyền
Giới thiệu
Đăng ký
Đăng nhập
0
Trang chủ
Luận Văn - Báo Cáo
Báo cáo khoa học
Báo cáo khoa học: Cloning, over-expression, purification and characterization of Plasmodium falciparum enolase
Đang chuẩn bị liên kết để tải về tài liệu:
Báo cáo khoa học: Cloning, over-expression, purification and characterization of Plasmodium falciparum enolase
Bình Nguyên
35
10
pdf
Đang chuẩn bị nút TẢI XUỐNG, xin hãy chờ
Tải xuống
We have cloned, over-expressed and purified enolase from Plasmodium falciparumstrain NF54 in Escherichia coliin active form, as an N-terminal His6-tagged protein. The sequence of the cloned enolase from the NF54 strain is identical to that of strain 3D7 used in full genome sequen-cing. The recombinant enolase (r-Pfen) could be obtained in large quantities ( 50 mg per litre of culture) in a highly purified form ( 95%). The purified protein gave a single band at 50 kDa on SDS/PAGE. MALDI-TOF analysis gave a mean ± SD mass of 51396 ± 16 Da, which is in good agreement with themass calculated fromthe sequence | Eur. J. Biochem. 271 4845-4854 2004 FEBS 2004 doi 10.1111 j.1432-1033.2004.04450.x Cloning over-expression purification and characterization of Plasmodium falciparum enolase Ipsita Pal-Bhowmick K. Sadagopan Hardeep K. Vora Alfica Sehgal Shobhona Sharma and Gotam K. Jarori Department of Biological Sciences Tata Institute of Fundamental Research Mumbai India We have cloned over-expressed and purified enolase from Plasmodium falciparum strain NF54 in Escherichia coli in active form as an N-terminal His6-tagged protein. The sequence of the cloned enolase from the NF54 strain is identical to that of strain 3D7 used in full genome sequencing. The recombinant enolase r-Pfen could be obtained in large quantities w 50 mg per litre of culture in a highly purified form 95 . The purified protein gave a single band at 50 kDa on SDS pAgE. mAlDI-TOF analysis gave a mean SD mass of 51396 16 Da which is in good agreement with the mass calculated from the sequence. The molecular mass of r-Pfen determined in gel-filtration experiments was w 100 kDa indicating that P. falciparum enolase is a homodimer. Kinetic measurements using 2-phosphoglycerate as substrate gave a specific activity of 30 U-mg 1 and Km2PGA 0.041 0.004 mM. The Michaelis constant for the reverse reaction KmPEP is 0.25 0.03 mM. pH-dependent activity measurements gave a maximum at pH 7.4-7.6 irrespective of the direction of catalysis. The activity of this enzyme is inhibited by Na whereas K has a slight activating effect. The cofactor Mg2 has an apparent activation constant of 0.18 O. 02 mM. However at higher concentrations it has an inhibitory effect. Polyclonal antibody raised against pure recombinant P. falciparum enolase in rabbit showed high specificity towards recombinant protein and is also able to recognize enolase from the murine malarial parasite Plasmodium yoelii which shares 90 identity with the P. falciparum protein. Keywords enolase homodimer localization Plasmodium falciparum purification. Malaria remains
TÀI LIỆU LIÊN QUAN
báo cáo khoa học: " Cloning of transgenic tobacco BY-2 cells; an efficient method to analyse and reduce high natural heterogeneity of transgene expression"
báo cáo khoa học: " Cloning and characterization of a glucosyltransferase from Crocus sativus stigmas involved in flavonoid glucosylation"
Báo cáo khoa học: "Cloning a new allele form of bovine TNF-α Jongsam Ahn"
Báo cáo khoa học: "Cloning of canine GM - CSF and SCF genes"
Báo cáo khoa học: "Human embryonic stem cells and therapeutic cloning"
Báo cáo khoa học: "Molecular cloning of the cDNA of canine homeodomaininteracting protein kinase 2"
Báo cáo y học: "Expression of leukemia inhibitory factor (LIF) and its receptor gp190 in human liver and in cultured human liver myofibroblasts. Cloning of new isoforms of LIF mRNA"
Báo cáo y học: " Cloning and characterization of microRNAs from wheat (Triticum aestivum L.)"
Báo cáo y học: "Analysis of bacterial DNA in synovial tissue of Tunisian patients with reactive and undifferentiated arthritis by broad-range PCR, cloning and sequencing"
Báo cáo y học: "Broad-range PCR, cloning and sequencing of the full 16S rRNA gene for detection of bacterial DNA in synovial fluid samples of Tunisian"
crossorigin="anonymous">
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.