Kinh doanh - Marketing
Kinh tế quản lý
Biểu mẫu - Văn bản
Tài chính - Ngân hàng
Công nghệ thông tin
Tiếng anh ngoại ngữ
Kĩ thuật công nghệ
Khoa học tự nhiên
Khoa học xã hội
Văn hóa nghệ thuật
Sức khỏe - Y tế
Văn bản luật
Nông Lâm Ngư
Kỹ năng mềm
Luận văn - Báo cáo
Giải trí - Thư giãn
Tài liệu phổ thông
Văn mẫu
Giới thiệu
Đăng ký
Đăng nhập
Tìm
Danh mục
Kinh doanh - Marketing
Kinh tế quản lý
Biểu mẫu - Văn bản
Tài chính - Ngân hàng
Công nghệ thông tin
Tiếng anh ngoại ngữ
Kĩ thuật công nghệ
Khoa học tự nhiên
Khoa học xã hội
Văn hóa nghệ thuật
Y tế sức khỏe
Văn bản luật
Nông lâm ngư
Kĩ năng mềm
Luận văn - Báo cáo
Giải trí - Thư giãn
Tài liệu phổ thông
Văn mẫu
Thông tin
Điều khoản sử dụng
Quy định bảo mật
Quy chế hoạt động
Chính sách bản quyền
Giới thiệu
Đăng ký
Đăng nhập
0
Trang chủ
Khoa Học Tự Nhiên
Sinh học
GIẢI TRÌNH TỰ GEN
Đang chuẩn bị liên kết để tải về tài liệu:
GIẢI TRÌNH TỰ GEN
Yến Thanh
174
19
ppt
Đang chuẩn bị nút TẢI XUỐNG, xin hãy chờ
Tải xuống
Có 2 phương pháp chính - Phương pháp hóa học Maxam – Gilbert: đây là phương pháp được sử dụng đầu tiên để xác định trình tự gen nhưng hiện nay không còn được sử dụng phổ biến nữa - Phương pháp Enzyme Sanger Nguyên lý - Sử dụng các chất hóa học cắt đứt sợi DNA lại 1 loại nucleotide đặc hiệu | GIẢI TRÌNH TỰ GEN C¸c ph¬ng ph¸p gi¶i tr×nh tù gen Cã 2 ph¬ng ph¸p chÝnh: Ph¬ng ph¸p ho¸ häc Maxam – Gilbert: ®©y lµ ph¬ng ph¸p ®îc sö dông ®Çu tiªn ®Ó x¸c ®Þnh tr×nh tù gen nhng hiÖn nay kh«ng cßn ®ù¬c sö dông phæ biÕn n÷a. Ph¬ng ph¸p Enzyme Sanger 1. Ph¬ng ph¸p ho¸ häc Maxam - Gilbert Walter Gilbert Nguyªn lý Sö dông c¸c chÊt ho¸ häc c¾t ®øt sîi DNA t¹i 1 lo¹i nucleotide ®Æc hiÖu Ph©n tö DNA kÐp ®îc ®¸nh dÊu P32 t¹i ®Çu 5’ T¸ch rêi 2 sîi ®¬n b»ng nhiÖt Xö lý ho¸ häc sao cho chØ cã 1 lo¹i nucleotide bÞ ph¸ huû -> hµng lo¹t ®o¹n DNA cã kÝch thíc kh¸c nhau ®îc t¹o thµnh (sö dông c¸c chÊt ho¸ häc kh¸c nhau ph¸ huû 4 lo¹i nucleotide b»ng 4 ph¶n øng riªng biÖt) TiÕn hµnh ®iÖn di c¸c ®o¹n DNA thu ®ù¬c trªn gel polyacrylamide, chØ quan s¸t ®ù¬c ®o¹n cã g¾n P32. §o¹n DNA ng¾n nhÊt cã ®¸nh dÊu phãng x¹ sÏ ch¹y nhanh nhÊt díi t¸c dông cña ®iÖn trêng. C¨n cø vµo vÞ trÝ c¸c v¹ch quan s¸t ®îc trªn gel mµ x¸c ®Þnh tr×nh tù c¸c nucleotide. 5’- Treat with chemicals that specifically cleave at a certain base. 4 tubes G-rxn A>G -rxn T>C -rxn C-rxn 5’- 5’- 5’- C The reaction is done such that each strand is cleaved only once C T A G ddNTP Reaction Mix 3’ G C A T T C C A T A G G 5’ MAXAM-GILBERT CHEMICAL SEQUENCING Labeled strand (P32) C C Sequence is read directly autoradiograph of dried sequencing gel Ph¸ huû c¸c nucleotide Trong ph¬ng ph¸p nµy sö dông 5 ph¶n øng c¬ b¶n: Dimethylsulfate ë pH 8.0 sÏ lµm thay ®æi Guanine (G). Piperidine formate ë pH 2.0 sÏ ph¸ vì cÇu nèi glycoside gi÷a deoxyribose víi purine (G,A) Hydrazine: më c¸c vßng pyrimidine (C , T) Hydrazine khi cã mÆt1.5M NaCl chØ cã t¸c dông ®èi víi C 1.2N NaOH ë 900C sÏ ph¸ huû A m¹nh vµ C kÐm. KÕt qu¶: Dimethylsulfate at pH 8.0 -----------> G Piperidine formate at pH 2.0 -------> G and A Hydrazine ------------------------------> C and T Hydrazine in 1.5 M NaCl -----------> C 1.2 N NaOH at 90 oC -----------------> A and C 5’GACGTACTTA3’ G G+A T+C C A>C 1.2 N NaOH at 90 oC A>C Hydrazine T+C Piperidine formate | GIẢI TRÌNH TỰ GEN C¸c ph¬ng ph¸p gi¶i tr×nh tù gen Cã 2 ph¬ng ph¸p chÝnh: Ph¬ng ph¸p ho¸ häc Maxam – Gilbert: ®©y lµ ph¬ng ph¸p ®îc sö dông ®Çu tiªn ®Ó x¸c ®Þnh tr×nh tù gen nhng hiÖn nay kh«ng cßn ®ù¬c sö dông phæ biÕn n÷a. Ph¬ng ph¸p Enzyme Sanger 1. Ph¬ng ph¸p ho¸ häc Maxam - Gilbert Walter Gilbert Nguyªn lý Sö dông c¸c chÊt ho¸ häc c¾t ®øt sîi DNA t¹i 1 lo¹i nucleotide ®Æc hiÖu Ph©n tö DNA kÐp ®îc ®¸nh dÊu P32 t¹i ®Çu 5’ T¸ch rêi 2 sîi ®¬n b»ng nhiÖt Xö lý ho¸ häc sao cho chØ cã 1 lo¹i nucleotide bÞ ph¸ huû -> hµng lo¹t ®o¹n DNA cã kÝch thíc kh¸c nhau ®îc t¹o thµnh (sö dông c¸c chÊt ho¸ häc kh¸c nhau ph¸ huû 4 lo¹i nucleotide b»ng 4 ph¶n øng riªng biÖt) TiÕn hµnh ®iÖn di c¸c ®o¹n DNA thu ®ù¬c trªn gel polyacrylamide, chØ quan s¸t ®ù¬c ®o¹n cã g¾n P32. §o¹n DNA ng¾n nhÊt cã ®¸nh dÊu phãng x¹ sÏ ch¹y nhanh nhÊt díi t¸c dông cña ®iÖn trêng. C¨n cø vµo vÞ trÝ c¸c v¹ch quan s¸t ®îc trªn gel mµ x¸c ®Þnh tr×nh tù c¸c nucleotide. 5’- Treat with chemicals that specifically .
TÀI LIỆU LIÊN QUAN
PCR giải trình tự
Bài giảng Giải trình tự gen thế hệ mới và ứng dụng chuẩn đoán bệnh
Giải phân rã hệ phương trình Raynolds hai chiều đứng bằng pháp phần tử hữu hạn hai giai đoạn với độ chính xác cao
Ebook Trình tự tu thiền
Đề tài: Nâng cao công tác quản lý trong giai đoạn bồi thường giải phóng mặt bằng của các dự án xây dựng trên địa bàn tỉnh Đồng Nai
Ebook Hệ phương trình - Kỹ năng và tư duy giải toán (Tập 2): Phần 1
Ebook Hệ phương trình - Kỹ năng và tư duy giải toán (Tập 1): Phần 2
Ebook Hệ phương trình - Kỹ năng và tư duy giải toán (Tập 2): Phần 2
Ebook Tư duy sáng tạo tìm tòi lời giải phương trình, bất phương trình, hệ phương trình đại số vô tỷ: Phần 1
Giáo án Bồi dưỡng giải toán trên máy tính điện tử Casio
crossorigin="anonymous">
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.