Kinh doanh - Marketing
Kinh tế quản lý
Biểu mẫu - Văn bản
Tài chính - Ngân hàng
Công nghệ thông tin
Tiếng anh ngoại ngữ
Kĩ thuật công nghệ
Khoa học tự nhiên
Khoa học xã hội
Văn hóa nghệ thuật
Sức khỏe - Y tế
Văn bản luật
Nông Lâm Ngư
Kỹ năng mềm
Luận văn - Báo cáo
Giải trí - Thư giãn
Tài liệu phổ thông
Văn mẫu
Giới thiệu
Đăng ký
Đăng nhập
Tìm
Danh mục
Kinh doanh - Marketing
Kinh tế quản lý
Biểu mẫu - Văn bản
Tài chính - Ngân hàng
Công nghệ thông tin
Tiếng anh ngoại ngữ
Kĩ thuật công nghệ
Khoa học tự nhiên
Khoa học xã hội
Văn hóa nghệ thuật
Y tế sức khỏe
Văn bản luật
Nông lâm ngư
Kĩ năng mềm
Luận văn - Báo cáo
Giải trí - Thư giãn
Tài liệu phổ thông
Văn mẫu
Thông tin
Điều khoản sử dụng
Quy định bảo mật
Quy chế hoạt động
Chính sách bản quyền
Giới thiệu
Đăng ký
Đăng nhập
0
Trang chủ
Kỹ Thuật - Công Nghệ
Điện - Điện tử
Hộp Điện Trong Công Nghệ DNA part 34
Đang chuẩn bị liên kết để tải về tài liệu:
Hộp Điện Trong Công Nghệ DNA part 34
Tấn Tài
42
5
pdf
Đang chuẩn bị nút TẢI XUỐNG, xin hãy chờ
Tải xuống
Tham khảo tài liệu 'hộp điện trong công nghệ dna part 34', kỹ thuật - công nghệ, điện - điện tử phục vụ nhu cầu học tập, nghiên cứu và làm việc hiệu quả | Phương pháp sàng lọc khuẩn lạc để phát hiện protein dung hợp được tiến hành như sau Nuôi cấy qua đêm ở 37oC một lượng nhỏ từ 5-10 khuẩn lạc trong môi trường LB có chứa ampicillin. Sau đó cảm ứng nuôi cấy bằng cách bổ sung thêm isopropylthio-P-galactoside IPTG cho vector pUR và tiếp tục nuôi ở 37oC đối với vector pEX thì chuyển nuôi cấy 37oC lên nhiệt độ 40oC và tiếp tục nuôi cấy có sục khí . Sau các khoảng thời gian nuôi cấy khác nhau 1 2 3 và 4 giờ. lấy 1 mL dịch nuôi cấy ly tâm nhanh để thu tiểu thể tái huyền phù chúng trong đệm 1 SDS biến tính ở 100oC trong 3 phút ly tâm 12.000 g trong 1 phút ở nhiệt độ phòng. Tiến hành điện di SDS trên polyacrylamide gel 6 . Dùng dịch huyền phù tế bào chỉ mang một mình vector làm đối chứng. Protein dung hợp sẽ xuất hiện như là một băng mới dịch chuyển chậm hơn băng P-galactosidase trong đối chứng. 4. Tách chiết các protein dung hợp để sản xuất kháng thể Protein dung hợp có thể được tách chiết theo một số cách dùng dịch chiết urea sắc ký ái lực aminophenylthiogalactoside điện di SDS-polyacrylamide gel hoặc phối hợp giữa các cách này. Phương pháp đơn giản nhất là điện di SDS-PAGE sodium dodecylsulfate-polyacrylamide gel electrophoresis như trình trình bày ở mục 3 nuôi cấy một lượng lớn trong 200 mL . Nhuộm gel và phát hiện băng protein mới sau đó cắt băng này ra khỏi gel đông khô khoảng 2 ngày rồi nghiền thành bột mịn. Bột này sẽ được dùng tiêm vào thỏ để sản xuất kháng thể. II. Sản xuất các protein nguyên thể Các protein nguyên thể có thể được sản xuất trong E. coli bằng cách sử dụng promoter điều hòa mạnh và một trình tự liên kết ribosome hiệu quả. Để biểu hiện gen prokaryote có trình tự liên kết ribosome mạnh chỉ cần cung cấp một promoter là đủ. Trong khi đó để biểu hiện một gen eukaryote hoặc một gen prokaryote với một trình tự liên kết ribosome yếu cần phải cung cấp cả promoter lẫn trình tự liên kết ribosome Hình 7.4 . Các mức độ biểu hiện có thể khác nhau từ dưới 1 cho tới hơn 30 protein hòa tan tổng số total soluble .
TÀI LIỆU LIÊN QUAN
Hộp Điện Trong Công Nghệ DNA part 5
Hộp Điện Trong Công Nghệ DNA part 6
Hộp Điện Trong Công Nghệ DNA part 7
Hộp Điện Trong Công Nghệ DNA part 9
Hộp Điện Trong Công Nghệ DNA part 10
Hộp Điện Trong Công Nghệ DNA part 11
Hộp Điện Trong Công Nghệ DNA part 12
Hộp Điện Trong Công Nghệ DNA part 13
Hộp Điện Trong Công Nghệ DNA part 14
Hộp Điện Trong Công Nghệ DNA part 15
crossorigin="anonymous">
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.