Kinh doanh - Marketing
Kinh tế quản lý
Biểu mẫu - Văn bản
Tài chính - Ngân hàng
Công nghệ thông tin
Tiếng anh ngoại ngữ
Kĩ thuật công nghệ
Khoa học tự nhiên
Khoa học xã hội
Văn hóa nghệ thuật
Sức khỏe - Y tế
Văn bản luật
Nông Lâm Ngư
Kỹ năng mềm
Luận văn - Báo cáo
Giải trí - Thư giãn
Tài liệu phổ thông
Văn mẫu
Giới thiệu
Đăng ký
Đăng nhập
Tìm
Danh mục
Kinh doanh - Marketing
Kinh tế quản lý
Biểu mẫu - Văn bản
Tài chính - Ngân hàng
Công nghệ thông tin
Tiếng anh ngoại ngữ
Kĩ thuật công nghệ
Khoa học tự nhiên
Khoa học xã hội
Văn hóa nghệ thuật
Y tế sức khỏe
Văn bản luật
Nông lâm ngư
Kĩ năng mềm
Luận văn - Báo cáo
Giải trí - Thư giãn
Tài liệu phổ thông
Văn mẫu
Thông tin
Điều khoản sử dụng
Quy định bảo mật
Quy chế hoạt động
Chính sách bản quyền
Giới thiệu
Đăng ký
Đăng nhập
0
Trang chủ
Khoa Học Tự Nhiên
Sinh học
Cloning, expression, and activity analysis of human cathepsin C in the yeast Pichia pastoris
Đang chuẩn bị liên kết để tải về tài liệu:
Cloning, expression, and activity analysis of human cathepsin C in the yeast Pichia pastoris
Duy Tân
61
8
pdf
Đang chuẩn bị nút TẢI XUỐNG, xin hãy chờ
Tải xuống
The yeast Pichia pastoris expression system was investigated for the production of human cathepsin C (CatC) recombinant protein. The full-length CatC cDNA, corresponding to amino acids 12–475, was synthesized from interleukin-2 (IL-2) stimulated human peripheral blood mononuclear cells and subcloned in the pGEM-T cloning vector. | Turkish Journal of Biology http://journals.tubitak.gov.tr/biology/ Research Article Turk J Biol (2017) 41: 746-753 © TÜBİTAK doi:10.3906/biy-1704-4 Cloning, expression, and activity analysis of human cathepsin C in the yeast Pichia pastoris Cenk DAĞLIOĞLU* Department of Molecular Biology and Genetics, Faculty of Science, İzmir Institute of Technology, Urla, İzmir, Turkey Received: 03.04.2017 Accepted/Published Online: 05.06.2017 Final Version: 10.11.2017 Abstract: The yeast Pichia pastoris expression system was investigated for the production of human cathepsin C (CatC) recombinant protein. The full-length CatC cDNA, corresponding to amino acids 12–475, was synthesized from interleukin-2 (IL-2) stimulated human peripheral blood mononuclear cells and subcloned in the pGEM-T cloning vector. After confirming the DNA sequence of the insert, the gene was cloned into the pPICZαA expression vector under the control of the methanol-inducible alcohol oxidase (AOX1) promoter and transformed to P. pastoris X-33 cells. The expressed protein was secreted into the culture medium through the α-factor mating signal sequence of the expression vector. Analysis of the culture supernatant revealed that the recombinant human CatC was secreted as a 58-kDa molecule, indicating that human CatC was accumulated in the culture supernatant as proform composed of the residual propart, the activation peptide, and the heavy and light chains. Extracellular recombinant proCatC was further activated by cysteine endoprotease papain in vitro and its activity was confirmed by assays using a synthetic substrate. Key words: Human cathepsin C, Pichia pastoris, recombinant protein, expression 1. Introduction Cathepsin C (dipeptidyl peptidase I, EC 3.4.14.1) is a lysosomal cysteine protease belonging to the papain superfamily (Izumya and Fruton, 1956). Besides its role in lysosomal protein degradation (Coffey and de Duve, 1968), CatC is a key enzyme in the activation of many serine proteinases that
TÀI LIỆU LIÊN QUAN
Cloning and expression of tomato leaf curl virus coat protein gene in E. coli
Molecular cloning, characterization, and expression analysis of a gene encoding a Ran binding protein (RanBP) in Cucumis melo L.
Molecular and in silico cloning, identification, and preharvest period expression analysis of a putative cytochrome P450 monooxygenase gene from Camellia sinensis (L.) Kuntze (tea)
Molecular cloning and expression analysis of FvMYB1 from Fraxinus velutina Torr
A new acidophilic thermostable endo-1,4-βmannanase from Penicillium oxalicum GZ-2: Cloning, characterization and functional expression in Pichia pastoris
Cloning and expression of the dengue virus non structural protein 1 (NS1) in E. coli
Cloning, expression and purification of m cell specific binding peptide (CO!) fused with CFP
Cloning, characterization, and expression of the gene encoding polygalacturonase-inhibiting proteins from strawberry
Cloning and expression of recombinant VP2 capsid protein gene of canine parvovirus in E. coli System
Cloning and expression of pigc gene in escherichia coli
crossorigin="anonymous">
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.