Kinh doanh - Marketing
Kinh tế quản lý
Biểu mẫu - Văn bản
Tài chính - Ngân hàng
Công nghệ thông tin
Tiếng anh ngoại ngữ
Kĩ thuật công nghệ
Khoa học tự nhiên
Khoa học xã hội
Văn hóa nghệ thuật
Sức khỏe - Y tế
Văn bản luật
Nông Lâm Ngư
Kỹ năng mềm
Luận văn - Báo cáo
Giải trí - Thư giãn
Tài liệu phổ thông
Văn mẫu
Giới thiệu
Đăng ký
Đăng nhập
Tìm
Danh mục
Kinh doanh - Marketing
Kinh tế quản lý
Biểu mẫu - Văn bản
Tài chính - Ngân hàng
Công nghệ thông tin
Tiếng anh ngoại ngữ
Kĩ thuật công nghệ
Khoa học tự nhiên
Khoa học xã hội
Văn hóa nghệ thuật
Y tế sức khỏe
Văn bản luật
Nông lâm ngư
Kĩ năng mềm
Luận văn - Báo cáo
Giải trí - Thư giãn
Tài liệu phổ thông
Văn mẫu
Thông tin
Điều khoản sử dụng
Quy định bảo mật
Quy chế hoạt động
Chính sách bản quyền
Giới thiệu
Đăng ký
Đăng nhập
0
Trang chủ
Khoa Học Tự Nhiên
Sinh học
Cloning, expression, and characterization of human brain acetylcholinesterase in Escherichia coli using a SUMO fusion tag
Đang chuẩn bị liên kết để tải về tài liệu:
Cloning, expression, and characterization of human brain acetylcholinesterase in Escherichia coli using a SUMO fusion tag
Thu Hường
59
11
pdf
Đang chuẩn bị nút TẢI XUỐNG, xin hãy chờ
Tải xuống
The molecular structure of acetylcholinesterase (AChE) attracts interest because of its versatility and significant role in the cholinergic system. The main purpose of the present study was to clone a full-length cDNA sequence of human brain acetylcholinesterase (hAChE) into pET SUMO vector and express it successfully. | Turkish Journal of Biology http://journals.tubitak.gov.tr/biology/ Research Article Turk J Biol (2017) 41: 77-87 © TÜBİTAK doi:10.3906/biy-1602-83 Cloning, expression, and characterization of human brain acetylcholinesterase in Escherichia coli using a SUMO fusion tag Hamid CEYLAN, Orhan ERDOĞAN* Department of Molecular Biology and Genetics, Faculty of Science, Atatürk University, Erzurum, Turkey Received: 23.02.2016 Accepted/Published Online: 29.06.2016 Final Version: 20.02.2017 Abstract: The molecular structure of acetylcholinesterase (AChE) attracts interest because of its versatility and significant role in the cholinergic system. The main purpose of the present study was to clone a full-length cDNA sequence of human brain acetylcholinesterase (hAChE) into pET SUMO vector and express it successfully. The integrity of the constructed plasmid was confirmed by cross PCR. This recombinant construct was expressed in Escherichia coli BL21 (DE-3). In this work, we produced hexahistidine (6xHis) tagged fusion protein by isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) induction and purified using nickel (Ni2+) affinity chromatography. Using anti-His antibody, we detected ~90 kDa fusion protein. The expression of the hAChE gene in a microbial host resulted in good biological activity. Using the Ellman method, the recombinant AChE exhibited activity with optima at pH 9.0 glycine–NaOH buffer and room temperature. Kinetic parameters, KM and Vmax, were determined as 0.63 and 0.69, respectively. Key words: Acetylcholinesterase, cloning, recombinant protein, enzyme characterization 1. Introduction Characteristic of cholinergic synapses is termination of synaptic transmission by neurotransmitter hydrolysis (Zimmerman and Soreq, 2006). Acetylcholinesterase (AChE) is present at all cholinergic synapses and exerts an essential role in cholinergic transmission by swiftly hydrolyzing the acetylcholine that is a key component of cholinergic signaling. This function of enzyme .
TÀI LIỆU LIÊN QUAN
Molecular cloning, characterization, and homologous expression of an endochitinase gene from Bacillus thuringiensis serovar morrisoni
Molecular cloning, characterization, and expression analysis of a gene encoding a Ran binding protein (RanBP) in Cucumis melo L.
A new acidophilic thermostable endo-1,4-βmannanase from Penicillium oxalicum GZ-2: Cloning, characterization and functional expression in Pichia pastoris
Cloning, characterization, and expression of the gene encoding polygalacturonase-inhibiting proteins from strawberry
Báo cáo khoa học: Gene cloning, expression and characterization of avian cathelicidin orthologs, Cc-CATHs, fromCoturnix coturnix
Cloning, expression, and characterization of human brain acetylcholinesterase in Escherichia coli using a SUMO fusion tag
cDNA cloning, molecular characterization, and expression analyses of two novel porcine ARRDC genes-ARRDC1 and ARRDC5
The dopamine β-hydroxylase gene in Chinese goose (Anas cygnoides): cloning, characterization, and expression during the reproductive cycle
Báo cáo khoa học: Cloning, expression and characterization of a new aspartate aminotransferase from Bacillus subtilis B3
Báo cáo khoa học: Molecular cloning, expression and characterization of protein disulfide isomerase from Conus marmoreus
crossorigin="anonymous">
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.