tailieunhanh - BÁO CÁO " NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG QUI TRÌNH mPCR CHẨN ĐOÁN ĐỒNG THỜI VI KHUẨN EDWARDSIELLA ICTALURI VÀ AEROMONAS HYDROPHILA TRÊN THẬN CÁ TRA (PANGASIANODON HYPOPHTHALMUS)"

Qui trình PCR phát hiện đồng thời vi khuẩn Edwardsiella ictaluri và Aeromonas hydrophila nhiễm trên thận cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) được thực hiện và chuẩn hoá. Mồi xuôi EiFd-1 và mồi ngược EiRs Rs được sử dụng để khuếch đại đoạn đặc hiệu trên gen 16S RNA của E. ictaluri với sản phẩm PCR là 407 bp (Panagala và ctv., 2009). M mồi xuôi AeroFd và mồi ngược AeroRs được sử dụng để khuếch đại gen Aerolysin của A. hydrophila với sản phẩm PCR là 209 bp (Panagala và ctv., 2009). Độ nhạy của qui trình là. | NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG QUI TRÌNH mPCR CHẨN ĐOÁN ĐỒNG THỜI VI KHUẨN EDWARDSIELLA ICTALURI VÀ AEROMONAS HYDROPHILA TRÊN THẬN CÁ TRA PANGASIANODON HYPOPHTHALMUS Lê Hữu Thôi Trương Quỳnh Như Nguyễn Hà Giang và Đặng Thị Hoàng Oanh Bộ môn sinh học và bệnh thuỷ sản Khoa Thủy Sản Đại học Cần Thơ thoi. 3042415@student. ctu. edu. vn tqnhu75@student. ctu. edu. vn giang. 3042342@student. ctu. edu. vn dthoanh@ctu. edu. vn ABSTRACT A PCR protocol for simultaneous detection of Edwardsiella ictaluri and Aeromonas hydrophila infection in kidney of striped catfish Pangasianodon hypophthalmus was optimized. The forward primer EiFd-1 and reverse primer EiRs were used to amplify a unique sequence of 16S RNA gene of E. ictaluri with a PCR product of 407 bp Panagala et al. 2009 . The forward primer AeroFd and reverse primer AeroRs were used to amplify Aerolysin gene of A. hydrophila with a PCR product of 209 bp Panagala et al 2009 . The lower detection limit was 100 pg for E. ictaluri and 1ng for A. hydrophila extracted DNA from striped catfish kidney. The diagnostic sensitivity and specificity of the PCR was evaluated with common bacterial isolates in aquaculture which are Vibrio harveyi V. alginolyticus V. cholerae A. sorbia A. carviae Pseudomonas putida Eschericchia coli Bacillus subtilis. The PCR appears to have good application for rapid sensitive specificity and low cost for detection of E. ictaluri A. hydrophila simultaneously in infected striped catfish. TÓM TẮT Qui trình PCR phát hiện đồng thời vi khuẩn Edwardsiella ictaluri và Aeromonas hydrophila nhiễm trên thận cá tra Pangasianodon hypophthalmus được thực hiện và chuẩn hoá. Mồi xuôi EiFd-1 và mồi ngược EiRs Rs được sử dụng để khuếch đại đoạn đặc hiệu trên gen 16S RNA của E. ictaluri với sản phẩm PCR là 407 bp Panagala và ctv 2009 . M mồi xuôi AeroFd và mồi ngược AeroRs được sử dụng để khuếch đại gen Aerolysin của A. hydrophila với sản phẩm PCR là 209 bp Panagala và ctv 2009 . Độ nhạy của qui trình là 100 pg DNA chiết tách từ .