tailieunhanh - Giới thiệu một số phương pháp tách ADN từ máu toàn phần - Tạp chí nghiên cứu y học

Tách chiết ADN là khâu cơ bản và rất quan trọng trong kỹ thuật sinh học phần tử. Chúng tôi đã tiến hành kỹ thuật tách chiết ADN từ máu ngoại vi: kỹ thuật perchlorate sodium, kỹ thuật Acetate amonium. kỹ thuật QIA ampkit. Đồng thời so sánh các kỹ thuật đó với nhau dựa trên một số tiêu chuẩn. | __________________________TCNCYH 23 3 2003 GIỚI THIỆU MỘT số PHƯƠNG PHÁP TÁCH ADN TỪ MÁU TQÀN PHẦN Lê Hoàn Trần Khánh Chi Phạm Thị Nguyệt Hằng Bạch Khánh Hòa Đại học Y Hà Nội Tách chiết ADN là khâu cơ bản và rất quan trọng trong kỹ thuật sinh học phân tử. Chúng tôi đã tiến hành một số kỹ thuật tách chiết ADN từ máu ngoại vi kỹ thuật Perchlorate sodium kỹ thuật Acetate amonium kỹ thuật QIA ampkit. Đồng thời so sánh các kỹ thuật đó với nhau dựa trên một số tiêu chuẩn. Kết quả cho thấy kỹ thuật Perchlorate sodium có nhiều ưu điểm nhấ t. Kỹ thuật này đang được sử dụng thường qui tại Labo Trung tâm Y sinh học Đại học Y Hà Nội. I. ĐẶT VẤN ĐỀ ADN Acid Deoxyribose Nucleic là một đại phân tử được câu thành từ các đơn phân là nucleotid. Trong cơ thể tât cả các tế bào có nhân đều chứa phân tử ADN. Phân tử này mang toàn bộ thông tin di truyền của cá thể. Nguồn thông tin di truyền đó được ổn định nhờ hoạt động tự sao chép của ADN theo nguyên tắc bán bảo tồn . Đồng thời thông qua hoạt động của các bộ máy tế bào nguồn thông tin này được chuyển sang các phân tử ARN thông tin ra ngoài bào tương tổng hợp nên phân tử protein ADN sao mã mARN dịch mã Protein Trên cơ sở đó sinh học phân tử đã phát triển các kỹ thuật di truyền trên ADN vào nghiên cứu và chẩn đoán một số bệnh. Để thực hiện kỹ thuật này đòi hỏi phải có nguồn nguyên liệu ADN đảm bảo cả về chất và lượng. Vì vậy tách chiết ADN là khâu đầu tiên cơ bản và rất quan trọng trong các qui trình thao tác trên ADN. Với tầm quan trọng đó đề tài này tiến hành ứng dụng một số kỹ thuật tách ADN khác nhau và so sánh chúng với nhau. Mục đích của đề tài là tìm ra một kỹ thuật phù hợp nhất với các tiêu chuẩn về chất lượng ADN hàm lượng ADN thời gian tiến hành chi phí thực hiện và mức độ độc hại đối với người thực hiện. II. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cúư 1. Đối tượng Máu ngoại vi chống đông bằng EDTA. 2. Phương pháp nghiên cứu Thực hiện một số kỹ thuật tách ADN khác nhau với nguyên lý cơn bản gồm 4 bước Phá vỡ hồng cầu Phá vỡ bạch cầu .