tailieunhanh - Biến nạp gen HbsAg trên một số giống cà chua bi (Lycopersicon esculentum Mill.)

Nội dung bài viết trình bày kết quả nghiên cứu chuyển gen mục tiêu HBsAg vào hai giống cà chua bi TN412 và TN84 bằng phương pháp dùng vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens và sử dụng kết hợp hai loại promoter nói trên để chuyển gen HBsAg vào đối tượng cây trồng này. Đây là kết quả nghiên cứu đầu tiên ở trong nước về biến nạp gen trên giống cà chua bi thương mại TN412. | J. Sci. Devel. 2014 Vol. 12 No. 7 1005-1014 Tạp chí Khoa học và Phát triển 2014 tập 12 số 7 1005-1014 BIẾN NẠP GEN HbsAg TRÊN MỘT SỐ GIỐNG CÀ CHUA BI Lycopersicon esculentum Mill. Nguyễn Thị Phương Nam1 Trần Thị Ngọc Hà1 Lê Hoàn Hảo1 Lê Tấn Đức1 Phạm Đức Trí1 Phan Tường Lộc1 Nguyễn Hữu Tâm1 Bùi Minh Trí2 Nguyễn Hữu Hổ1 1Viện Sinh học nhiệt đới Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam 2 Trường Đại học Nông Lâm Thành phố Hồ Chí Minh Email nguyenhuuho@ Ngày gửi bài Ngày chấp nhận TÓM TẮT Nội dung bài này đề cập một số kết quả nghiên cứu về biến nạp di truyền tạo cây mang gen HBsAg mã hóa protein vỏ virus viêm gan B trên một số giống cà chua bi như TN 412 và TN 84 phục vụ định hướng dài hạn tạo vacxin từ thực vật. Kết quả nghiên cứu tái sinh chồi từ lá mầm hai giống góp phần tạo tiền đề cho nghiên cứu biến nạp gen. Lá mầm hai giống 7 ngày tuổi được gây nhiễm và nuôi chung với vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens mang gen HBsAg promoter PDS T7 gen nptlI kháng kanamycin và gen gusA. Sau 2 ngày nuôi chung mô với vi khuẩn lá mầm được rửa sạch vi khuẩn và nuôi cấy chọn lọc trên môi trường MS có bổ sung 0 5 mg l IAA 2 mg l BA 500 mg l cefotaxime và 30 - 50 mg l kanamycin. Qua ít nhất bốn lần cấy chuyển 15 - 20 ngày lần trên môi trường chọn lọc nhiều dòng cây chuyển gen ở cả hai giống đã được thu nhận các dòng cây chuyển gen đã được kiểm tra sự hiện diện và biểu hiện của các gen chuyển bằng kỹ thuật PCR kỹ thuật hóa mô tế bào GUS kỹ thuật PCR Southern blot và Western blot. Một số cá thể Ti của một dòng cây chuyển gen T0 đã được kiểm tra sự hiện diện và biểu hiện của gen nptll bằng thử nghiệm định tính in vitro khả năng kháng kanamycin và bằng kỹ thuật PCR tương tự gen HBsAg ở cá thể Ti cũng đã được kiểm tra bằng kỹ thuật PCR. Từ khóa Agrobacterium tumefaciens cà chua bi Lycopersicon esculentum Mill. chuyển gen gen HbsAg lá mầm. Genetic Transformation of Some Cherry Tomato Lycopersicon esculentum Mill. Cultivars with The HbsAg .