tailieunhanh - Luận văn Thạc sĩ Khoa học: Xác định kiểu gen virus viêm gan C trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan C bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT-PCR

Luận văn với những mục tiêu như sau: Xác định tỉ lệ người mang kiểu gen HCV bằng phương pháp RT-PCR sử dụng Taqman probe; xác định lại kiểu gen Type 1 bằng phương pháp giải trình tự gen (Sequencing) trên đoạn gen NS5B. | Phương Thị Hà Luận văn Thạc sĩ khoa học ĐẶT VẤN ĐỀ Bệnh viêm gan do virut C là có ảnh hưởng lớn đến tình trạng sức khỏe của con người trên toàn thế giới bởi vì sau khi bị nhiễm virus viêm gan C cấp tính thì có khoảng 70-90 bệnh nhân chuyển từ giai đoạn cấp tính sang giai đoạn mạn tính và có tới 20-25 trong số bệnh nhân này sẽ chuyển qua giai đoạn xơ gan và ung thư gan 17 33 36 . Theo tổ chức y tế thế giới có khoảng 170 triệu người nhiễm virut viêm gan C HCV tương ứng với khoảng 2-3 tổng dân số toàn thế giới 14 26 .Theo ghi nhận về tình hình nhiễm virut viêm gan C ở Việt Nam thì tỉ lệ người bình thường bị nhiễm căn bệnh này là khoảng 6 42 xem như là thuộc nhóm các quốc gia có tỉ lệ nhiễm viêm gan C cao trên thế giới 13 42 . HCV là một virut có bộ gen là ARN trong chu kỳ nhân đôi của virut phải sử dụng men ARN polymerase mà men này không có khả năng sửa sai trong quá trình tổng hợp ARN từ đó làm cho bộ gen của virus rất đa dạng nên người ta đã phân virus thành nhiều loại type khác nhau 7 50 và con đường lây nhiễm chủ yếu của HCV là qua đường máu. Sau khi xác định được người dương tính với anti-HCV Bác sĩ trước khi cho chỉ đinh điều trị phải làm xét nghiệm hai yếu tố quan trọng có vai trò tiên lượng cho thành công cũng như thời gian điều trị cần thiết là định lượng số lượng siêu vi trong máu HCV-ARN và định kiểu gen của siêu vi gây viêm gan C HCV Genotypes 1 37 . Kiểu gen HCV phân bố khác nhau tùy theo vùng địa lý mỗi châu lục hay mỗi nước có những kiểu gen nổi trội riêng 41 43 . Hiện nay trên thế giới đã biết được 6 loại genotypes và khoảng hơn 50 subtype dưới type 3 7 ở Việt Nam phổ biến genotypes 1 2 và 6 kiểu genotype 3 hiếm gặp 1 50 . Để xác định được genotypes HCV thì ngày nay với sự phát triển của công nghệ sinh học đặc biệt là chuyên ngành công nghệ sinh học phân tử đã phát minh nhiều kỹ thuật để xác định kiểu gen HCV. Trên thế giới có nhiều công ty Bayer Beckman Coulter QIAgen Roche. đã cho ra đời các bộ kit xác định genotypes HCV với độ chính xác cao. Tuy .