tailieunhanh - Chuyển gen GNA kháng rầy rệp vào cây bông vải bằng vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens

Nghiên cứu biến nạp gen Galanthus nivalisagglutinin (GNA) vào cây bông vải tạo giống bông vải kháng rầy rệp, đồng thời hạn chế sự lây nhiễm của virus xanh lùn vào cây bông vải, do tác động của protein GNA tạo ra trong cây bông vải chuyển gen. | J. Sci. Devel. 2015 Vol. 13 No. 5 747-754 Tạp chí Khoa học và Phát triển 2015 tập 13 số 5 747-754 CHUYỂN GEN GNA KHÁNG RẦY RỆP VÀO CÂY BÔNG VẢI BẰNG VI KHUẨN Agrobacterium tumefaciens Phạm Đức Trí Hoàng Văn Dương Lê Tấn Đức Phan Tường Lộc Mai Trường Nguyễn Hữu Hổ Viện Sinh học Nhiệt đới Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam Email phamductri 75@gmail. com Ngày gửi bài Ngày chấp nhận TÓM TẮT Trong nghiên cứu chuyển gen GNA Galanthus nivalis agglutinin vào cây bông vải giống Coker 312 trụ mầm bông vải in vitro sau khi xử lý với vi khuẩn Agrobacterium tumafaciens dòng EHA 105 mang gen GNA điều khiển bởi promoter RSs1 được chọn lọc trên môi trường phát sinh mô sẹo bổ sung 50 mg l kanamycin. Mô sẹo kháng kháng sinh hình thành từ trụ mầm được chuyển sang môi trường tạo mô sẹo có khả năng sinh phôi rồi tiếp tục chuyển sang môi trường phát sinh phôi và cuối cùng là môi trường nảy chồi phôi. Cây bông vải chuyển gen được hình thành từ những phôi này. Những dòng cây chuyển gen được minh chứng bằng kỹ thuật PCR và Southern blot. Gen GNA biểu hiện tốt trong cây chuyển gen khi đánh giá bằng kỹ thuật Western blot. Từ khóa Agrobacterium tumafaciens cây bông Coker 312 chuyển gen gen GNA. Insect Resistance Gene GNAj Transformation into Cotton by Agrobacterium tumefaciens ABSTRACT Hypocotyl explants of cotton Gossypium hirsutum L. cv. Coker 312 were transformed with Agrobacterium tumefaciens strain EHA 105 containing the GNA gene under the control of RSs1 promoter and selected on callus initiation medium containing kanamycin. Somatic embryogenesis was promoted in the surviving calli. Plantlets were recovered from putative transgenic embryos. Polymerase Chain Reaction PCR and Southern blot analysis were used to confirm the integration of GNA transgene into the plant genome. Western blot result indicated the expression of the GNA gene in transgenic cotton plants. Keywords Agrobacterium tumafaciens Cotton Coker 312 genetic transformation GNA .