tailieunhanh - Xây dựng quy trình chiết xuất và phương pháp định lượng Stigmasterol trong cây ráy bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao

Quy trình chiết xuất stigmasterol toàn phần từ bột dược liệu ráy (Alocasia odora (Roxb.) ) trên soxhlet trong 5 giờ trong dung môi chloroform được thực hiện và kiểm soát bằng phương pháp sắc ký lớp mỏng khi triển khai trên hệ dung môi n-hexan/ethyl axetat (8:2), xác định vết bằng thuốc thử Liebermann-Burchard. Hàm lượng stigmasterol được xác định bởi phương pháp HPLC nhanh chóng và có độ nhạy cao, trên cột C8 với nhiệt độ cột 30ºC ±1, hệ dung môi pha động là acetonitril/đệm phosphate (93:7) p H 4,8 với tốc độ dòng 1ml/phút, thể tích tiên 20µl, bước sóng phát hiện tại 195nm. Phương pháp HPLC cho tương thích cao với các thông số sắc ký có RSD | TẠP CHÍ KHOA HỌC Đại học Huế Số 63 2010 XÂY DỰNG QUY TRÌNH CHIẾT XUẤT VÀ PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG STIGMASTEROL TRONG CÂY RÁY Alocasia odora Roxb. C. Koch BẰNG SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO Trần Hữu Dũng Trường Đại học Y Dược Đại học Huế Đặng Thị Ngọc Hoa Trường Đại học Khoa học Đại học Huế TÓM TẮT Quy trình chiết xuất stigmasterol toàn phần từ bột dược liệu ráy Alocasia odora Roxb. C. Koch trên soxhlet trong 5 giờ trong dung môi chloroform được thực hiện và kiểm soát bằng phương pháp sắc ký lớp mỏng khi triển khai trên hệ dung môi n-hexan ethyl axetat 8 2 xác định vết bằng thuốc thử Liebermann-Burchard. Hàm lượng stigmasterol được xác định bởi phương pháp HPLC nhanh chóng và có độ nhạy cao trên cột C8 với nhiệt độ cột 300C 1 hệ dung môi pha động là acetonitril đệm phosphate 93 7 pH 4 8 với tốc độ dòng Iml phút thể tích tiên 20pl bước sóng phát hiện tại 195nm. Phương pháp HPLC cho tương thích cao với các thông số sắc ký có RSD 2 . Khoảng tuyến tính của nồng độ stigmasterol được khảo sát từ 10--300ppm r 0 9995 . Phương pháp được thẩm định cho độ chính xác và độ đúng thích hợp với tỷ lệ phục hồi của stigmasterol từ bột ráy đạt 95 2 giới hạn định lượng là 10ppm. I. Đặt vấn đề Cây ráy Alocasia odora Roxb. C. Koch hay còn gọi là môn bạc hà ráy bạc hà bạc hà đôi khi còn gọi là ráy dại dã vu. Thân rễ ráy được dùng làm thuốc trong phạm vi kinh nghiệm nhân dân chủ yếu chữa bệnh ngoài da như mề đay đơn ngứa lỡ khó chữa sần da chảy nước nấu nước tắm rửa xát vào nơi bị lá han gây ngứa tấy nhiều nơi dùng với tác dụng giảm đau do vẹo cổ đau xương khớp điều trị gan nhiễm mỡ 1 3 . Phytosterol là một trong những thành phần hóa học của cây ráy có hoạt tính sinh học và hàm lượng cao. Stigmasterol là một trong những thành phần chính của phytosterol có tác dụng giảm lượng cholesterol trong máu kháng viêm dùng trong tổng hợp progesterone và là tiền chất của vititam D3 3 4 6 . Hiện nay xu hướng và yêu cầu tiêu chuẩn hóa chất lượng dược liệu theo WHO nói chung cũng như ở Việt Nam nói riêng là .