tailieunhanh - Vector chuyển gen là NST nhân tạo của nấm men và động vật có vú

Các nhiễm sắc thể nhân tạo của nấm men YAC Do nhu cầu tạo dòng với những trình tự DNA ngày càng lớn, các nhà nghiên cứu tìm tòi phát triển những vector ngày càng mới. Ngày nay người ta đã tạo ra YAC cho phép tạo dòng với những đoạn DNA dài 150 - , trung bình là 350kb. Bằng nghiên cứu cho thấy ở nấm men (Saccharomyces Cerevisiae), nhiễm sắc thể muốn nhân đôi và phân ly tốt cần ba trình tự: | Vector chuyển gen là NST nhân tạo của nấm men và động vật có vú Các nhiễm sắc thể nhân tạo của nấm men YAC Do nhu cầu tạo dòng với những trình tự DNA ngày càng lớn các nhà nghiên cứu tìm tòi phát triển những vector ngày càng mới. Ngày nay người ta đã tạo ra YAC cho phép tạo dòng với những đoạn DNA dài 150 - trung bình là 350kb. Bằng nghiên cứu cho thấy ở nấm men Saccharomyces Cerevisiae nhiễm sắc thể muốn nhân đôi và phân ly tốt cần ba trình tự - 2 TEL telomere Trình tự đầu cuối của NST - CEN centrmere - tâm động Trình tự trung tâm của NST đảm bảo sự chia đôi và đi về 2 cực của tế bào - ARS autonomously replicating sequence Trình tự sao chép tự chủ tương tự như ori ở plasmid Dựa vào đó người ta đã cấu tạo NST nhân tạo có đủ ba trình tự nói trên với cấu tạo gồm 2 cánh tay giữa 2 cánh tay người ta có thể cài đặt một đoạn DNA cần tạo dòng với kích thước khoảng 150 đến . Trên mỗi cánh tay gồm các gen đánh dấu di truyền để chọn lọc các tế bào nấm men có chứa YAC và các chuỗi tận cùng có chức năng telomer đoạn cuối của NST. Một trong hai cánh tay mang một mảnh DNA hoạt động như một tâm động và một nguồn tái bản ori. Việc cài DNA lạ vào gen mã hóa chất ức chế tRNA vận chuyển tyrsine sẽ làm biến đổi màu sắc khuẩn lạc tế bào gốc có mang gen hổ phách khuẩn lạc từ trắng sang đỏ khi có mặt của DNA lạ. Đây là dấu hiệu về sự hiện diện của YAC tái tổ hợp trong tế bào nấm men. Các nhiễm sắc thể này được đưa vào tế bào chủ nấm men nó được nhân lên như NST khác ở trong tế bào nấm men và ta có được những gen mong muốn. Các nhiễm sắc thể nhân tạo của động vật có vú - Cấu tạo Tương tự như YAC và bao gồm - Trình tự TEL - Trình tự CEN - Trình tự ARS Nhưng khác với YAC là trình tự TEL và CEN có nguồn gốc từ người. Điều này cho phép MAC Mammalian Artificiel Chromosomes vào tế bào động vật có vú và giữ được ổn định trong tế bào. - Mục đích sử dụng Chủ yếu sử dụng nghiên cứu cho các tế bào bậc cao mà chúng ta không sử dụng được với tế bào nấm men. Khi đưa NST vào tế bào chủ nó