tailieunhanh - Vector chuyển gen là cosmid

Các cosmid là những vector lai nhân tạo từ một plasmid với các trình tự cos của phage λ (được sử dụng từ năm 1978). Các trình tự cos này điều khiển sự đóng gói DNA tái tổ hợp vào đầu của phage. Khi bao gói các vùng cos đều bị cắt, chỉ còn một phần DNA của cosmid được giới hạn bởi các đầu dính với đoạn cài DNA lạ được bao gói. Trong phản ứng bao gói in vitro, các protein cần thiết cho sự tạo thành đầu và đuôi phải được thêm vào để cho các phage. | Vector chuyển gen là cosmid Các cosmid là những vector lai nhân tạo từ một plasmid với các trình tự cos của phage X được sử dụng từ năm 1978 . Các trình tự cos này điều khiển sự đóng gói DNA tái tổ hợp vào đầu của phage. Khi bao gói các vùng cos đều bị cắt chỉ còn một phần DNA của cosmid được giới hạn bởi các đầu dính với đoạn cài DNA lạ được bao gói. Trong phản ứng bao gói in vitro các protein cần thiết cho sự tạo thành đầu và đuôi phải được thêm vào để cho các phage có thể tự hợp thành. Cosmid là những plasmid có các vùng giới hạn mà tại đây người ta có thể cài lắp DNA lạ và một gen chống chịu ampicilline. Kích thước cosmid 5kb do đó nó có thể nhận được đoạn cài 35 45kb và có thể tới 47kb như chúng ta đã thấy ở Mục đầu của phage X có thể bao gói được 52kb . Vào thời điểm gây nhiễm E. Coli DNA tái tổ hợp được phóng vào vi khuẩn. Trong vi khuẩn các đầu dính sẽ bắt cặp tạo ra cosmid tái tổ hợp khép kín dạng vòng và tái bản như một plasmid. Ưu điểm và ứng dụng của cosmid Cũng như phage cosmid cho khả năng xâm nhiễm tế bào vi khuẩn lớn nhận đoạn cài có kích thước lớn. Vùng cát bằng RE DNA ngoại lùi Cấu tạo cosmid Trong tế bào chủ nó tự nhân bản như plasmid. Cho nên người ta nhận được những khuẩn lạc chứ không phải đĩa phân giải trên mặt thạch thuận lợi cho việc quan sát. Với những tiện lợi trên người ta dùng cosmid để tách dòng từ những gen lớn để tạo ngân hàng genom bộ gen . Những vi khuẩn mang vector này có khả năng chống chịu với môi trường có ampiciline. Các vector chuyền gen là phage Phage thực khuẩn thể là virus xâm nhiễm vi khuẩn làm phân giải vi khuẩn. Việc sử dụng phage làm vector chuyển gen có nhiều ưu điểm hơn so với vector là plasmid - Dễ xâm nhập vào vi khuẩn - Khả năng nhân lên nhanh trong tế bào chủ - Khả năng tiếp nhận đoạn DNA lạ lớn hơn plasmid. Tuy nhiên việc sử dụng phage có nhiều bất lợi như - Thao tác ghép DNA lạ phức tạp - DNA tái tổ hợp không tạo thành khuẩn lạc như DNA tái tổ hợp là plasmid mà thành đĩa phân giải .