tailieunhanh - Phương pháp tách RNA tổng số và mRNA

Tách RNA tổng số RNA được tiến hành chiết tách gồm các bước cơ bản tương tự như DNA (bao gồm phá vỡ màng tế bào, loại protein, tủa RNA) nhưng ở đây ta dùng enzyme desoxyribonuclease (DNase) để phân huỷ DNA. Do RNA kém bền và dể bị phân huỷ bởi enzyme ribonuclease (RNase) có nhiều ở khắp nơi, hoạt tính cao lại bền với nhiệt (trên 90°C), vì vậy, điều kiện thao tác để chiết tách phải được tiến hành trong môi trường vô cùng nghiêm ngặt. . | Phương pháp tách RNA tổng số và mRNA Tách RNA tổng số RNA được tiến hành chiết tách gồm các bước cơ bản tương tự như DNA bao gồm phá vỡ màng tế bào loại protein tủa RNA nhưng ở đây ta dùng enzyme desoxyribonuclease DNase để phân huỷ DNA. Do RNA kém bền và dể bị phân huỷ bởi enzyme ribonuclease RNase có nhiều ở khắp nơi hoạt tính cao lại bền với nhiệt trên 90 C vì vậy điều kiện thao tác để chiết tách phải được tiến hành trong môi trường vô cùng nghiêm ngặt. Phương pháp chung để tách RNA tổng số được tiến hành như sau - Tế bào được nghiền với chất tẩy rửa SDS sarcocyl nồng độ cao nitơ lỏng để biến tính protein. Đồng thời mẫu cũng được nghiền với chất khử 2-mercaptoethanol để ức chế RNase. Nước sử dụng cũng được xử lý với DEPC Diethylpyrocarbonat cũng để loại bỏ RNase. - Các protein DNA được loại bỏ qua xử lý mẫu với hỗn hợp dung môi Trizol phenol pH 4 guanidinium thiocyanate glycerol sodium acetate khi ly tâm ta tách được RNA trong pha nước. DNA ở pH 4 bị hấp phụ vào pha dưới cùng với phenol protein biến tính nằm giữa hai pha cũng bị loại cùng với DNA cùng với pha phenol. RNA trong pha nước được hút ra sau đó tủa bằng izopropanol để -20 C li tâm và rửa lại bàng ethalnol 79 thu hồi RNA tinh khiết bảo quản lạnh để làm các thí nghiệm tiếp theo. Chất lượng của RNA tổng số được đánh giá sơ bộ qua điện di trên gel agarose. Tách từng loại RNA khác nhau Dựa vào kích thước trọng lượng phân tử người ta có thể tiến hành sắc kí điện di hoặc ly tâm để tách từng loại RNA. Phương pháp tách mRNA Do kích thước bé lại chiếm lượng nhỏ R 5 RNA tổng số có cấu trúc đa dạng nên không thể tách bằng phương pháp trên. Nhờ đặc điểm mRNA có đuôi polyA do đó người ta tách mRNA ra khỏi mẫu bằng phương pháp sắc ký ái lực oligodt-xenlulose. Ngày nay trên thị trường có loại viên bi từ trên bề mặt có gắn oligodt. Sau khi mRNA bám trên bề mặt các viên bi từ thông qua liên kết bổ sung với oligodt các viên bi này thu nhận và đem ly tâm ta thu được mRNA tinh khiết. Lưu ý rằng để tách mRNA người ta đi từ

• Sinh học
• Phương pháp tách RNA
• mRNA
• công nghệ sinh học
• phương pháp thí nghiệm
• thí nghiệm sinh học
• luận văn tốt nghiệp
• khóa luận tốt nghiệp
• tách chiết DNA
• báo cáo công nghệ môi trường
• kĩ thuật tách chiết NA
• Hạt nano cobalt hóa trị 0
• Hoạt tính quang hợp
• Lá cây đậu tương
• Glycine max (L
• ) Merr
• Tổng hợp cDNA từ khuôn RNA tổng số
• Phương pháp tách chiết RNA tổng số
• Sinh học phân tử
• Bài giảng Sinh học phân tử
• Kỹ thuật phân tích
• Tách chiết RNA
• Phương pháp sắc ký
• bản sao cDNA
• Chiết tách RNA
• Bài thuyết trình An toàn phòng thí nghiệm
• An toàn Sinh học PTN Y sinh
• Phòng thí nghiệm Y sinh
• Yêu cầu phòng thí nghiệm Y sinh
• Nguyên tắc phòng thí nghiệm Y sinh
• Nguy cơ phòn thí nghiệm Y sinh
• Đề tài nghiên cứu khoa học
• Thực hành thí nghiệm môn Hóa học
• Phương pháp hướng dẫn thí nghiệm Hóa học
• Hướng dẫn học sinh thí nghiệm Hóa học
• Các loại thí nghiệm Hóa học
• Các phương pháp dạy thí nghiệm
• Thí nghiệm công nghệ sinh học
• Thí nghiệm vi sinh vật học
• Vi sinh vật học
• Nghiên cứu vi sinh vật
• Bảo quản giống vi sinh vật
• Vi sinh vật gây bệnh
• Chất lượng giống vi sinh vật
• Giống vi sinh vật
• Môi trường nuôi cấy vi sinh vật
• Báo cáo thực tập
• Quá trình thí nghiệm năng lượng sinh học
• Thiết bị thí nghiệm năng lượng sinh học
• Phòng thí nghiệm năng lượng sinh học
• Thí nghiệm năng lượng sinh học
• Nghiên cứu ethanol từ rơm rạ
• Thí nghiệm đường cong sinh trưởng
• thí nghiệm với nấm men
• Tăng cường hứng thú học tập
• Hứng thú học tập
• Bài tập thí nghiệm
• Thí nghiệm giáo khoa
• Thí nghiệm tự tạo
• Thí nghiệm trên máy vi tính
• Thí nghiệm sự thẩm thấu tế bào
• Tính thấm của tế bào
• Sự thẩm thấu tế bào
• Thực hành thí nghiệm sinh học 10
• Thao tác thí nghiệm sinh học
• Phòng thí nghiệm
• An toàn sinh học
• An ninh sinh học phòng thí nghiệm
• Trang thiết bị phòng thí nghiệm
• Phòng thí nghiệm cơ bản
• Thí nghiệm vật lý
• Dạy học thí nghiệm vật lý
• Hướng dẫn sử dụng thí nghiệm vật lý
• Tổ chức thí nghiệm vật lý
• Phương pháp dạy học Vật lý
• Dạy học Vật lý theo hướng tích cực
• An toàn phòng thí nghiệm
• Nội quy phòng thí nghiệm
• An toàn hóa chất
• Dụng cụ phòng thí nghiệm
• Xây dựng E book học phần Thí nghiệm
• Thí nghiệm thực hành phương pháp dạy học
• Thí nghiệm Hóa học
• E book dạy học thí nghiệm Hóa học
• Dạy học tích cực
• Công nghệ thông tin trong dạy học
• Cách sử dụng thí nghiệm Hóa học
• Tổ chức hoạt động học tập tích cực
• Tổ chức học tập cho HS lớp 10
• Dạy học có sử dụng thí nghiệm
• Thiết kế thí nghiệm dạy học Hóa học
• Một số thí nghiệm về enzim
• pH đối với enzim
• Tính đặc hiệu của enzim
• Thí nghiệm tính đặc hiệu của enzim
• Thí nghiệm sinh học 6
• Sinh học 6
• Thực hành sinh học
• Thí nghiệm quang hợp
• Xác định chất khí thải
• Xác định chất lá cây
• Thí nghiệm vi sinh vật học thực phẩm
• Vi sinh vật học thực phẩm
• Phương pháp định lượng vi sinh vật
• Định lượng vi sinh vật
• Tính chất sinh lý vi sinh vật
• tế bào thực vật
• Luận án Tiến sĩ
• Luận án Khoa học Giáo dục
• Phương pháp dạy học bộ môn Hóa học
• Phát triển năng lực dạy học thí nghiệm
• Đào tạo sinh viên sư phạm hóa học
• Thí nghiệm thực hành Hoá
• Quan sát tế bào dưới kính hiển vi
• Thí nghiệm co nguyên sinh
• Thí nghiệm phản co nguyên sinh
• Cấu tạo tế bào
• Hình dạng tế bào
• Thí nghiệm hóa sinh thực phẩm
• Thí nghiệm hóa sinh
• Hóa sinh thực phẩm
• Tính chất của protein
• Tính chất động học của enzym ureaza
• Thí nghiệm tính chất của protein
• Chỉ tiêu vi sinh vật của thực phẩm
• Vệ sinh công nghiệp
• Kiểm tra vi sinh vật
• Đánh giá thực trạng thí nghiệm vật lí đại cương
• Nâng cao hiệu quả thí nghiệm vật lí đại cương
• Thí nghiệm vật lí đại cương
• Nâng cao chất lượng thực hành vật lí đại cương
• Thí nghiệm vật lí trong trường phổ thông
• Thí nghiệm Sinh học 7 Bài 52
• Thực hành Thí nghiệm Sinh học
• Giáo án điện tử Sinh học
• Thiết kế bài giảng Sinh học bài 52
• Sự sinh sản của thú
• Sự di chuyển của thú