tailieunhanh - Thiết kế Plasmid tái tổ hợp từ vector biểu hiện BAC7 mang gen ENTP dung hợp với các phân đoạn BAAMYLF1 và BAAMYLF1 để tổ hợp Enterocin P trong Bacillus Subtilis 168

Enterocin P của E Plaecium P13 đã được biểu hiện thành công trong 168 dưới hai dạng lai với một phần gen amylase của B amylolyquefaciens,. nội dung bài viết "Thiết kế PLASMID tái tổ hợp từ vector biểu hiện BAC7 mang gen ENTP dung hợp với các phân đoạn BAAMLF1 và BAAMLF1 để tổ hợp Enterocin P trong Bacillus Subtilis 168" dưới đây để hiểu hơn về vấn đề này. | Tạp chí Công nghệ Sinh học 8 1 13-20 2010 THIẾT KẾ PLASMID TÁI TỔ HỢP TỪ VECTOR BIỂU HIỆN PAC7 MANG GEN ENTP DUNG HỢP VỚI CÁC PHÂN ĐOẠN BAAMYLF1 VÀ BAAMYLF2 ĐỂ TỔNG HỢP ENTEROCIN p TRONG BACILLUS SỦBTILIS168 Nguyễn Thanh Nhàn1 Phạm Thị Minh Đúc2 Lê Thu Ngọc3 Lê Văn Trường1 Đỗ Thị Huyền1 Trần Ngọc Tân1 Phạm Thùy Linh4 Trương Nam Hải1 1 Viện Công nghệ sinh học Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam 2 Trường Đại học Bách Khoa Đà Nằng 3Trường Đại học Khoa học tự nhiên Đại học Quốc gia Hà Nội 4 Viện Hóa học TÓM TẮT Với hoạt tính kháng khuẩn mạnh và phổ tác dụng rộng trên nhiều vi khuẩn gây bệnh như Listeria monocytogenes Staphylococcus aureus Bacillus cereus enterocin p của chủng Enterococcus faecium P13 đã được sàn xuất tái tổ hợp trong các hệ biểu hiện khác nhau như Escherichia coli Pichia pastoris Lactococcus lactis Methylobacterium extorquens. Trong nghiên cứu này chứng tôi biểu hiện enterocin p cùa chùng E. faecium P13 trong vi khuẩn Bacillus subtilis 168 một trong những chửng biểu hiện đã được nghiên cứu kĩ đảm bảo tính an toàn khi ứng dụng và có khả năng tiết một lượng lớn protein ra môi trường nuôi cấy. Đê tránh hiện tượng phân cắt peptide tái tổ hợp do tác động của protease của tế bào chủ đoạn gen entP dài 132 bp được dung hợp với các phân đoạn gen baamylFl 0 7 kb và baamylF2 1 0 kb trước khi đưa vào vector pAC7 để tạo thành plasmid tái tổ họp pAC-amyll-entP và pAC-amyl2-entP. Các đoạn gen dung hợp baamylFl-entP và baamylF2-entP sau khi tích hợp vào hệ gen của B. subtilis được biểu hiện trong môi trường LB bổ sung 10pg ml kanamycin. Protein tái tổ họp BaamylFl-Enterocin p và BaamylF2-Enterocin p thu được từ môi trường sau 24 h nuôi cấy được xử lý với 50 formic acid để phân cắt enterocin p khỏi dạng dung hợp. Kết quà thử hoạt tính kháng khuẩn đối vói các vi sinh vật chỉ thi là s. aureus B. cereus cho thấy enterocm p sau khi được phân cắt từ đoạn peptide dung họp có khả năng ức chế sự sinh trưởng và phát triển của các vi khuẩn này. Như vậy enterocin p được biểu hiện

• Sinh học
• Thiết kế Plasmid
• Tái tổ hợp từ vector
• Biểu hiện BAC7
• Phân đoạn BAAMYLF1
• Phân đoạn BAAMYLF1
• Tổ hợp Enterocin
• Tạp chí khoa học
• Công nghệ sinh học
• Vi khuẩn Bacillus subtilis 168
• Hoạt tính kháng khuẩn
• Vi khuẩn gây bệnh ở cơ thể
• luận văn sinh học
• tổng hợp protein
• tế bào vi khuẩn
• xử lý chuỗi polypetide
• bản chất protein
• Luận văn Thạc sĩ Sinh học ứng dụng
• Nhân dòng gen mã hóa anthocyanidin reductase
• Vector biểu hiện gen mã hóa anthocyanidin reductase
• Cơ chế sinh tổng hợp catechin
• Phản ứng cắt plasmid
• Khoa học nông nghiệp
• Thụ thể nicotine
• Điều hòa tính thèm ăn
• Gen PACAP trong vùng giữa bụng dưới đồi