tailieunhanh - BÁO CÁO THỰC HÀNH MÔN CÔNG NGHỆ PROTEIN - ENZYME

Sinh viên giải thích được nguyên lý của phương pháp sắc ký lọc gel và sắc ký trao đổi ion. - Biết cách chuẩn bị gel, làm sắc ký. - Biết cách xây dựng đồ thị nồng độ thành phần protein trong mẫu. i ion (Ion –Exchange Chromatography): chung: - Sắc ký là một họ các kỹ thuật hóa học phân tích dùng để tách các chất trong một hỗn hợp và được tiến hành lần đầu bởi nhà thực vật học người Nga MikhailTsvet (Mikhail Semyonovich Tsvet) vào năm 1903 khi ông đang nghiên cứu về chlorophyll | TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC -----------q -- BÁO CÁO THỰC HÀNH MÔN CÔNG NGHỆ PROTEIN - ENZYME Sinh viên thực hiện Đinh Hoàng Yến Lớp 5 K55 - CNsHb Mã sinh viên 550513 Giáo viên hướng dẫn TS. Nguyễn Thành Trung Hà Nội 2012 1 Bài 4 s ắ c ký 1 ọ c g e 1 và s ắ c ký tr ao đ ồ i ion I - Mục đích yêu cầu - Sinh viên giải thích được nguyên lý của phương pháp sắc ký lọc gel và sắc ký trao đổi ion. - Biết cách chuẩn bị gel làm sắc ký. - Biết cách xây dựng đồ thị nồng độ thành phần protein trong mẫu. II - Phương p h á p 1. s ắ c ký trao đồ i ion Ion -Exchange Chromatography a Giới thiệu chung - Sắc ký là một họ các kỹ thuật hóa học phân tích dùng để tách các chất trong một hỗn hợp và được tiến hành lần đầu bởi nhà thực vật học người Nga MikhailTsvet Mikhail Semyonovich Tsvet vào năm 1903 khi ông đang nghiên cứu về chlorophyll. - Sắc ký trao đổi ion là một phương pháp sắc ký lỏng rắn mà pha tĩnh là hợp chất có khả năng trao đổi ion gọi là các ionit . - Sắc ký trao đổi ion được phân loại dựa trên cơ chế của quá trình tách do ái lực khác nhau của các ion trong dung dịch pha động với các trung tâm trao đổi ion nhóm chứa ion trên chất rắn pha tĩnh . - Đây là phương pháp được sử dụng nhiều trong các phòng thí nghiệm Hóa những thống kê mới nhất IEC là kỹ thuật tách protein được sử dụng nhiều nhất trong các quy trình tinh chế có thể bao gồm nhiều bước và nhiều kỹ thuật khác nhau IEC 75 sắc ký ái lực AC 60 sắc ký lọc gel GF 50 các trường hợp. - Trước tiên chất cần phân tích sẽ gắn thuận nghịch với các chất trao đổi bằng tương tác ion giữa các nhóm mang điện tích trái dấu. - Sau đó các ion đã trao đổi được chiết rút riêng biệt bằng phương pháp rửa giải hoặc rửa đẩy. Có thể tách chiết bằng cách thay đổi pH ít dùng hơn khiến các nhóm tương tác trên chất phân tích bị mất điện tích. b Cơ sở củ a ph ương ph áp - Cơ sở của IEC là sự cạnh tranh các nhóm tích điện trái dấu trên chất trao đổi giữa các ion của chất cần tách với các ion khác. - Khi nồng độ