tailieunhanh - Báo cáo " Nghiên cứu tái sinh in vitro và chuyển gen green fluorescent protein vào cây hoa loa kèn (Lilium longgiflorum) nhờ vi khuẩn agrobacterium"

Tham khảo bài viết 'báo cáo " nghiên cứu tái sinh in vitro và chuyển gen green fluorescent protein vào cây hoa loa kèn (lilium longgiflorum) nhờ vi khuẩn agrobacterium"', luận văn - báo cáo phục vụ nhu cầu học tập, nghiên cứu và làm việc hiệu quả | Tạp chí Khoa học và Phát triển 2009 Tập 7 số 2 121- 129 TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI NGHIÊN CỨU TÁI SINH IN VITRO VÀ CHUYỂN GEN GREEN FLUORESCENT PROTEIN VÀO CÂY HOA LOA KÈN LILIUM LONGGFLORUM NHỜ VI KHUẨN AGROBACTERIUM Study on In vitro Regeneration and GFP Gene Transfer in Lilium longiflorum via Agrobacterium tumefaciens Nguyễn Thị Lý Anh Đinh Trường Sơn Nguyễn Thị Thanh Phương Nguyễn Thị Hoa Viện Sinh học Nông nghiệp Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội TÓM TẮT Kỹ thuật chuyển gen được sử dụng để chọn tạo các giống cây trồng mang đặc tính mong muốn. Thông qua nghiên cứu nuôi cấy mô vảy củ in vitro và chuyển gen GFP green fluorescent protein vào callus hoa loa kèn trắng Lilium longiflorum nhờ vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens đã xác định được môi trường tái sinh thích hợp cho mô nuôi cấy và làm rõ ảnh hưởng của một số khâu kỹ thuật đến quá trình chuyển gen. Khẳng định được môi trường tốt nhất để tạo callus là MS 8 saccarose 0 5mg l BA 0 5mg l 2 4D và để tái sinh chồi từ callus nên sử dụng môi trường MS 2 saccarose 0 25mg l BA. Quá trình chuyển gen GFP đạt hiệu quả cao khi callus được nuôi cấy khởi động 5 ngày trước khi lây nhiễm vi khuẩn và để lây nhiễm vi khuẩn callus được cắt trên giấy thấm ngâm trong dung dịch vi khuẩn trong 5 phút sau đó đồng nuôi cấy trong 3 ngày. Gen GFP được biểu hiện với tỷ lệ cao ở callus 52 38 - 62 35 và rễ của cây tái sinh 31 25 - 52 94 trong khi ở chồi tái sinh tỷ lệ này chỉ đạt 1 25 . Các kết quả này là cơ sở cho các nghiên cứu tiếp theo trong tạo giống hoa loa kèn chuyển gen. Từ khoá Chuyển gen GFP Lilium longiflorum tái sinh. SUMMARY The in vitro regeneration and GFP gene transfer to Lilium longiflorum via Agrobacterium tumefaciens were studied with the aim to determine optimal regeneration medium and influences of technical stages on gene transformation. The combination of and 6-benzyladenine BA in Murashige and Skoog 1962 basic medium proved effective in inducing callus formation. The MS medium containing BA at mg .