tailieunhanh - Sản xuất protein Erythropoietin thông qua quá trình chuyển gen trên tế bào CHO – K1

Erythropoietin (EPO) là nhân tố tăng trưởng máu, chịu trách nhiệm chính cho việc kích thích, điều hòa sự sản xuất hồng cầu ở động vật hữu nhũ. EPO được sử dụng trong điều trị bệnh thiếu máu liên quan đến suy thận mãn tính. EPO tái tổ hợp trên thị trường rất khan hiếm và có giá thành cao. Quá trình chuyển gene epo vào tế bào CHO - K1 bằng ExGen 500 được thực hiện nhằm tạo dòng tế bào có khả năng sản xuất Erythropoietin. Sau khi xác định sự biểu hiện protein tạm thời thành công, tế bào được nuôi cấy. | Tạp chí Khoa học và Phát triển 2010 Tập 8 số 3 498 - 504 TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI SAN XUẤT PROTEIN ERYTHROPOIETIN THÔNG QUA QUÁ TRÌNH CHUYỂN GEN TRÊN TÊ BÀO CHO - K1 CHINESE HAMSTER OVARY Development Erythropoietin via Transfection of Chinese Hamster Ovary Cell Type K1 CHO - K1 Lê Trầm Nghĩa Thư1 Trần Phong1 Hoàng Thanh Tuấn1 Quan Quốc Đăng2 Đỗ Minh Sĩ1 Đàm Sao Mai3 1Phòng thí nghiệm Nghiên cứu và Ứng dụng tế bào gốc Trường Đại học Khoa học Tự nhiên 2Phòng thí nghiệm Công nghệ Sinh học động vật Trường Đại học Công nghiệp 3Phòng thí nghiệm Sinh học phân tử Trường Đại học Công nghiệp Địa chỉ email tác giả liên lạc damsaomai@ Ngày gửi đăng Ngày chấp nhận TÓM TẮT Erythropoietin EPO là nhân tố tăng trưởng máu chịu trách nhiệm chính cho việc kích thích điều hòa sự sản xuất hồng cầu ở động vật hữu nhũ. EPO được sử dụng trong điều trị bệnh thiếu máu liên quan đến suy thận mãn tính. EPO tái tổ hợp trên thị trường rất khan hiếm và có giá thành cao. Quá trình chuyển gene epo vào tế bào CHO - K1 bằng ExGen 500 được thực hiện nhằm tạo dòng tế bào có khả năng sản xuất Erythropoietin. Sau khi xác định sự biểu hiện protein tạm thời thành công tế bào được nuôi cấy chọn lọc trong môi trường có Zeocin 100 pg ml . Bằng phương pháp PCR tế bào sau chọn lọc được xác định có sự biểu hiện gen epo. Năng suất sản xuất EPO trung bình của những tế bào này được định lượng qua phương pháp ELISA sandwich là 2 055 0 015 pg tế bào ngày. Từ khóa Chuyển gene EPO protein tái tổ hợp tế bào CHO-K1. SUMMARY Erythropoietin EPO is a haemopoietic growth factor. It is primarily responsible for stimulating and regulating erythropoiesis in mammals. EPO was first used therapeutically for the treatment of anaemia associated with chronic kidney failure. Recombinant EPO is not readily available in the market and temporarily its price is relatively high. Therefore we transfected and detected CHO - K1 cells expressing epo gene by transfecting pEPO .