Kinh doanh - Marketing
Kinh tế quản lý
Biểu mẫu - Văn bản
Tài chính - Ngân hàng
Công nghệ thông tin
Tiếng anh ngoại ngữ
Kĩ thuật công nghệ
Khoa học tự nhiên
Khoa học xã hội
Văn hóa nghệ thuật
Sức khỏe - Y tế
Văn bản luật
Nông Lâm Ngư
Kỹ năng mềm
Luận văn - Báo cáo
Giải trí - Thư giãn
Tài liệu phổ thông
Văn mẫu
Giới thiệu
Đăng ký
Đăng nhập
Tìm
Danh mục
Kinh doanh - Marketing
Kinh tế quản lý
Biểu mẫu - Văn bản
Tài chính - Ngân hàng
Công nghệ thông tin
Tiếng anh ngoại ngữ
Kĩ thuật công nghệ
Khoa học tự nhiên
Khoa học xã hội
Văn hóa nghệ thuật
Y tế sức khỏe
Văn bản luật
Nông lâm ngư
Kĩ năng mềm
Luận văn - Báo cáo
Giải trí - Thư giãn
Tài liệu phổ thông
Văn mẫu
Thông tin
Điều khoản sử dụng
Quy định bảo mật
Quy chế hoạt động
Chính sách bản quyền
Giới thiệu
Đăng ký
Đăng nhập
0
Trang chủ
Luận Văn - Báo Cáo
Báo cáo khoa học
Báo cáo khoa học: Large-scale overproduction, functional purification and ligand affinities of the His-tagged human histamine H1 receptor
tailieunhanh - Báo cáo khoa học: Large-scale overproduction, functional purification and ligand affinities of the His-tagged human histamine H1 receptor
This report describes an efficient strategy for amplified functional purification of the human H1 receptor after heterologous expression in Sf9 cells. The cDNA encoding a C-terminally histidine-tagged (10xHis) human histamineH1 receptor was used to generate recombinant baculovirus in a Spodoptera frugiperda-derived cell line (IPLB-Sf9). As judged from its ligand affinity profile, functional receptor could be expressed at high levels (30–40 pmol per 10 6 cells). | Eur. J. Biochem. 271 2636-2646 2004 FEBS 2004 doi Large-scale overproduction functional purification and ligand affinities of the His-tagged human histamine H1 receptor Venkata R. P. Ratnala1 Herman G. P. Swarts2 Jenny VanOostrum2 Rob Leurs3 Huub J. M. DeGroot1 Remko A. Bakker3 and Willem J. DeGrip1 2 1 Leiden Institute of Chemistry Leiden University department of Biochemistry UMC-160 Nijmegen Center for Molecular Life Sciences University Medical Center Nijmegen 3Department of Pharmacochemistry Division of Medicinal Chemistry Leiden Amsterdam Center for Drug Research Vrije Universiteit Amsterdam the Netherlands This report describes an efficient strategy for amplified functional purification of the human H1 receptor after heterologous expression in Sf9 cells. The cDNA encoding a C-terminally histidine-tagged 10xHis human histamine H1 receptor was used to generate recombinant baculovirus in a Spodoptera frugiperda-derived cell line IPLB-SÍ9 . As judged from its ligand affinity profile functional receptor could be expressed at high levels 30-40 pmol per 106 cells . Rapid proteolysis in the cell culture led to limited fragmentation without loss of ligand binding but could be efficiently suppressed by including the protease inhibitor leupeptin during cell culture and all subsequent manipulations. Effective solubilization of functional receptor with optimal recovery and stability required the use of dodecylmaltoside as a detergent in the presence of a high concentration of NaCl and of a suitable inverse agonist. Efficient purification of solubilized receptor could be achieved by affinity chro matography over nickel II nitrilotriacetic acid resin. Functional membrane reconstitution of purified H1 receptor was accomplished in mixed soybean lipids asolectin . The final proteoliposomic H1 receptor preparation has a purity greater than 90 on a protein basis and displays a ligand binding affinity profile very similar to the untagged receptor .
Diệu Loan
39
11
pdf
Báo lỗi
Trùng lắp nội dung
Văn hóa đồi trụy
Phản động
Bản quyền
File lỗi
Khác
Upload
Tải xuống
đang nạp các trang xem trước
Bấm vào đây để xem trước nội dung
Tải xuống
TÀI LIỆU LIÊN QUAN
TÀI LIỆU XEM NHIỀU
Một Case Về Hematology (1)
8
461928
55
Giới thiệu :Lập trình mã nguồn mở
14
23012
64
Tiểu luận: Tư tưởng Hồ Chí Minh về xây dựng nhà nước trong sạch vững mạnh
13
10968
531
Câu hỏi và đáp án bài tập tình huống Quản trị học
14
10160
451
Phân tích và làm rõ ý kiến sau: “Bài thơ Tự tình II vừa nói lên bi kịch duyên phận vừa cho thấy khát vọng sống, khát vọng hạnh phúc của Hồ Xuân Hương”
3
9563
104
Ebook Facts and Figures – Basic reading practice: Phần 1 – Đặng Tuấn Anh (Dịch)
249
8362
1127
Tiểu luận: Nội dung tư tưởng Hồ Chí Minh về đạo đức
16
8272
423
Mẫu đơn thông tin ứng viên ngân hàng VIB
8
7886
2225
Đề tài: Dự án kinh doanh thời trang quần áo nữ
17
6808
256
Giáo trình Tư tưởng Hồ Chí Minh - Mạch Quang Thắng (Dành cho bậc ĐH - Không chuyên ngành Lý luận chính trị)
152
6036
1456
TỪ KHÓA LIÊN QUAN
Báo cáo khoa học
Report medicine
traditional medicine
scientific reports
breast cancer
biological activities
environmental medicine
Current occupational
Environmental health
Environmental medical history
Electronic health records
Occupational health
Davidsons self assessment in medicine
Clinical decision making
Clinical therapeutics
Principles of infectious disease
Acute medicine
medical analysis
cytoplasm
bacteria
biochemical studies
Crystal structure
TÀI LIỆU MỚI ĐĂNG
MySQL Database Usage & Administration PHẦN 7
37
166
0
16-05-2024
B2B Content Marketing: 2012 Benchmarks, Budgets & Trends
17
146
0
16-05-2024
QUẢN LÝ CHẤT LƯỢNG KHÔNG KHÍ
75
143
0
16-05-2024
Diseases of the Liver and Biliary System - part 1
33
136
0
16-05-2024
Báo cáo nghiên cứu nông nghiệp " Biofertiliser inoculant technology for the growth of rice in Vietnam: Developing technical infrastructure for quality assurance and village production for farmers "
12
95
0
16-05-2024
Bài giảng hệ điều hành : HỆ ĐIỀU HÀNH NÂNG CAO part 4
6
120
0
16-05-2024
ĐỀ THI THỬ ĐH NĂM 2011 MÔN VẬT LÍ _ ĐỀ SỐ 101
7
91
0
16-05-2024
Phương pháp trăc nghiệm 7
6
103
0
16-05-2024
Giáo trình hình thành tỷ suất dinh lợi và các phương thức thanh toán nợ theo dư nợ ban đầu p3
5
96
1
16-05-2024
báo cáo hóa học:" A decade of modelling research yields considerable evidence for the importance of concurrency: a response to Sawers and Stillwaggon"
7
88
0
16-05-2024
TÀI LIỆU HOT
Mẫu đơn thông tin ứng viên ngân hàng VIB
8
7886
2225
Giáo trình Tư tưởng Hồ Chí Minh - Mạch Quang Thắng (Dành cho bậc ĐH - Không chuyên ngành Lý luận chính trị)
152
6036
1456
Ebook Chào con ba mẹ đã sẵn sàng
112
3784
1250
Ebook Tuyển tập đề bài và bài văn nghị luận xã hội: Phần 1
62
5401
1137
Ebook Facts and Figures – Basic reading practice: Phần 1 – Đặng Tuấn Anh (Dịch)
249
8362
1127
Giáo trình Văn hóa kinh doanh - PGS.TS. Dương Thị Liễu
561
3546
656
Tiểu luận: Tư tưởng Hồ Chí Minh về xây dựng nhà nước trong sạch vững mạnh
13
10968
531
Giáo trình Sinh lí học trẻ em: Phần 1 - TS Lê Thanh Vân
122
3745
527
Giáo trình Pháp luật đại cương: Phần 1 - NXB ĐH Sư Phạm
274
4157
523
Bài tập nhóm quản lý dự án: Dự án xây dựng quán cafe
35
4184
483
crossorigin="anonymous">
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.