tailieunhanh - Sinh học phân tử - Chương 4

Tái bản DNA I. Chứng minh tái bản DNA theo cơ chế bán bảo thủ 1. Cơ chế tái bản bán bảo thủ . Cơ chế tái bản ở prokaryote Đặc điểm cơ bản của sự tái bản đó là tái bản theo phương thức bán bảo thủ (semiconservative replication). Tái bản bán bảo thủ nghĩa là trong hai chuỗi của tất cả các phân tử DNA bao giờ cũng có: - Một chuỗi của DNA cũ (từ một trong hai chuỗi của DNA mẹ). - Một chuỗi của DNA mới (mới được tổng hợp). . | Chương 4 Tái bản DNA I. Chứng minh tái bản DNA theo cơ chế bán bảo thủ 1. Cơ chế tái bản bán bảo thủ . Cơ chế tái bản ở prokaryote Đặc điểm cơ bản của sự tái bản đó là tái bản theo phương thức bán bảo thủ semiconservative replication . Tái bản bán bảo thủ nghĩa là trong hai chuỗi của tất cả các phân tử DNA bao giờ cũng có - Một chuỗi của DNA cũ từ một trong hai chuỗi của DNA mẹ . - Một chuỗi của DNA mới mới được tổng hợp . Mỗi một lần tái bản đều có sự tách rời của hai chuỗi của DNA mẹ đồng thời mỗi chuỗi mẹ tiến hành sao chép để cho một chuỗi con chuỗi này sau đó lại kết hợp với chuỗi mẹ. Vị trí mở xoắn kép và tổng hợp DNA mới cùng một lúc trên DNA gọi là chạc ba tái bản replication fork do cấu trúc của vùng tái bản có hình chữ Y. Sự tổng hợp DNA mới gắn liền với việc mở xoắn DNA cũ. . Cơ chế tái bản ở eukaryote Sự tái bản ở tế bào eukaryote phức tạp hơn so với ở tế bào prokaryote nhưng cơ chế của sự tái bản ở eukaryote cũng tương tự như ở prokaryote và tiến hành theo các nguyên tắc - Hai hướng. - Bổ sung đối song song theo chiều 5 3 . - Không liên tục ở một trong hai chuỗi. - Cần những RNA primer. Tuy nhiên có một số điểm khác như sau - Trong khi ở prokaryote chỉ có một điểm khởi đầu thì sự tái bản ở eukaryote bắt đầu cùng một lúc ở nhiều điểm khởi đầu. Điều này là cần thiết do DNA của eukaryote có chiều dài rất lớn. - Vận tốc phát triển của chạc ba tái bản ở eukaryote khoảng 50 nucleotide s chỉ bằng 1 10 so với ở E. coli. Sinh học phân tử 76 2. Thí nghiệm của Meselson và Stahl Những thí nghiệm của Meselson và Stahl 1957 đã chứng minh lý thuyết tái bản DNA theo kiểu bán báo thủ Hình . Các tác giả trên đã nuôi cấy E. coli trong nhiều thế hệ trong một môi trường chứa 15NH4Cl làm nguồn cung cấp nitrogen duy nhất. Bằng cách này DNA được tổng hợp có 15N 15N là một chất phóng xạ nặng hơn chất phóng xạ thông thường 14N . Ở một thời điểm nhất định thời điểm 0 các tác giả này đã chuyển nuôi cấy vào một môi trường chứa 14NH4Cl. Tiếp đến sau từng thời gian đều đặn