tailieunhanh - Báo cáo nghiên cứu khoa học: " NGHIÊN CỨU BIỂU HIỆN β-GALACTOSIDASE TRONG E. COLI BL21"

β-galactosidase là enzyme xúc tác phản ứng thủy phân liên kết β-1,4-D galactoside trong phân tử đường lactose thành glucose và galactose, được ứng dụng rộng rãi trong công nghiệp chế biến sữa, trong y học để chế biến thuốc hỗ trợ tiêu hoá. Trên thế giới, đã có một số công. | TẠP CHÍ KHOA HỌC Đại học Huế Số 55 2009 NGHIÊN CỨU BIỂU HIỆN P-GALACTOSIDASE TRONG E. COLI BL21 Trần Văn Giang Trường Đại học Sư phạm Đại học Huế TÓM TẮT ì-galactosidase là enzyme xúc tác phản ứng thuỷ phân liên kết ì - 1 4-D galactoside trong phân tử đường lactose thành glucose và galactose. Để biểu hiện được enzyme này trong E. coli BL21 chúng tôi đã tiến hành chèn gene đích đã tinh sạch vào vector biểu hiện pET sau đó chúng tôi đã tinh sạch vector tái to hợp. tiến hành biến nạp vào tế bào E. coli BL21 và đã biểu hiện được protein này ờ nhiệt độ và pH thích hợp sau khi cảm ứng với IPTG. 1. M. đầu P-gaíactosiđase là enzyme xúc tác phản ứng thủy phân liên kết P-1 4-D galactoside trong phân tử đường lactose thành glucose và galactose được ứng đụng rộng rãi trong công nghiệp chế biến sữa trong y học để chế biến thuốc hỗ trợ tiêu hoá. Trên thế giới đã có một số công trình công bố về tạo dòng và biểu hiện P-galactosidase từ Lactobacillus reuteri 103 1 và Bacillus megaterium 2 . Ở Việt Nam Nguyễn Văn Cách 2008 đã tạo dòng P-galactosidase từ Aspergillus oryzae và xác định một số tính chất lý-hóa của nó 3 . Trần Văn Giang Nguyễn Sỹ Lê Thanh Quyền Đình Thi 2008 đã tạo dòng và phân tích trình tự gen mã hóa P-galactosidase từ chủng Bacillus subtilis G1 4 . Nhiều người khi uống sữa có hiện tượng đau bụng và tiêu chảy do bị dị ứng với đường lactose trong sữa đây là một dạng đường chủ yếu trong thành phần sữa. Sau khi uống sữa nếu bị khó tiêu đầy hơi sôi bụng hay tiêu chảy đau bụng thì chắc chắn họ bị dị ứng với lactose trong sữa. Lactose khi vào đến ruột sẽ được thủy phân thành galactose và glucose nhờ vào enzyme lactase P-galactosidase ở vi khuẩn có ở thành ruột non. Trong trường hợp thiếu lactase lactose không được thủy phân sẽ bị tống ra ngoài dưới dạng tiêu chảy. Những người không tiêu hóa được lactose do họ thiếu lactase bẩm sinh hoặc lactase bị thoái hóa từ thuở thơ ấu. Trên thế giới và Việt Nam đã có một số nghiên cứu về P-galactosidase có nguồn gốc từ các sinh vật. Tuy