tailieunhanh - Kỹ thuật lai phân tử Southern blot, Northern blot

Là hiện tượng sau khi hai mạch của phân tử DNA tách rời nhau dưới tác động của nhiệt độ nóng chảy, sẽ kết hợp lại với nhau ở điều kiện nhiệt độ được làm giảm từ từ, kết hợp với điều kiện thí nghiệm thích hợp. Sự bắt cặp trở lại sẽ không xảy ra nếu nhiệt độ phản ứng hạ xuống đột ngột. | GVHD : Trần Hồng Bảo Quyên Lớp : DHSH07LT Nhóm : 16 STT Họ và tên MSSV 01 Trần Thị Hồng Diễm 11273681 02 Phan Thị Mỹ Dung 11312171 03 Võ Hải Đăng 11269501 04 Dương Hoài Bảo 11294681 05 Phạm Trần Phương Trang 06 Nguyễn Hoàng Tuấn Nghĩa 11268621 07 Huỳnh Công Hướng 11307141 08 Lê Văn Thái Là hiện tượng sau khi hai mạch của phân tử DNA tách rời nhau dưới tác động của nhiệt độ nóng chảy, sẽ kết hợp lại với nhau ở điều kiện nhiệt độ được làm giảm từ từ, kết hợp với điều kiện thí nghiệm thích hợp. Sự bắt cặp trở lại sẽ không xảy ra nếu nhiệt độ phản ứng hạ xuống đột ngột. Để định vị những trình tự đặc biệt trên DNA bộ gene hay những DNA kích thước nhỏ như DNA plasmid, phage. Dựa trên nguyên tắc biến tính và hồi tính của phân tử DNA. - Dựa vào nguyên tắc bổ sung giữa các cặp nucleotide: A – T, G – C (các đoạn polynucleotid mạch đơn có trình tự bổ sung). Lập bản đồ giới hạn của một gene. Phát hiện các đa dạng trình tự của cùng một gene ở các chủng hay các cá thể khác nhau qua sự so sánh bản đồ giới hạn của chúng. Phát hiện các đột biến mất đoạn, đột biến điểm hay tái tổ hợp trên một gene vì chúng làm thay đổi bản đồ giới hạn. Để xác định kích thước và hàm lượng của một mRNA đặc trưng trong một hỗn hợp RNA. Dựa vào nguyên tắc bổ sung giữa các cặp nucleotide: A – U, G – C (các đoạn polynucleotid mạch đơn có trình tự bổ sung). Xác định được hàm lượng và độ dài của mRNA. Xác định và so sánh mức độ biểu hiện của các gen khác nhau ở các loại tế bào, mô và cơ quan khác nhau của cùng một cơ thể trong cùng một giai đoạn hoặc ở các giai đoạn khác nhau của quá trình phát triển cơ thể. Southern blot Northern blot Xác định trình tự DNA Xác định trình tự RNA Sử dụng enzym cắt giới hạn Không sử dụng enzym cắt giới hạn Biến tính bằng dung dịch kiềm tính Biến tính bằng formaldehyde Lai DNA – DNA Lai RNA – RNA hoặc RNA - DNA | GVHD : Trần Hồng Bảo Quyên Lớp : DHSH07LT Nhóm : 16 STT Họ và tên MSSV 01 Trần Thị Hồng Diễm 11273681 02 Phan Thị Mỹ Dung 11312171 03 Võ Hải Đăng 11269501 04 Dương Hoài Bảo 11294681 05 Phạm Trần Phương Trang 06 Nguyễn Hoàng Tuấn Nghĩa 11268621 07 Huỳnh Công Hướng 11307141 08 Lê Văn Thái Là hiện tượng sau khi hai mạch của phân tử DNA tách rời nhau dưới tác động của nhiệt độ nóng chảy, sẽ kết hợp lại với nhau ở điều kiện nhiệt độ được làm giảm từ từ, kết hợp với điều kiện thí nghiệm thích hợp. Sự bắt cặp trở lại sẽ không xảy ra nếu nhiệt độ phản ứng hạ xuống đột ngột. Để định vị những trình tự đặc biệt trên DNA bộ gene hay những DNA kích thước nhỏ như DNA plasmid, phage. Dựa trên nguyên tắc biến tính và hồi tính của phân tử DNA. - Dựa vào nguyên tắc bổ sung giữa các cặp nucleotide: A – T, G – C (các đoạn polynucleotid mạch đơn có trình tự bổ sung). Lập bản đồ giới hạn của một gene. Phát hiện các đa dạng trình tự của cùng một gene ở các chủng hay các cá thể khác nhau qua sự so sánh bản đồ giới hạn của chúng. Phát hiện các đột biến mất đoạn, đột biến điểm hay tái tổ hợp trên một gene vì chúng làm thay đổi bản đồ giới hạn. Để xác định kích thước và hàm lượng của một mRNA đặc trưng trong một hỗn hợp RNA. Dựa vào nguyên tắc bổ sung giữa các cặp nucleotide: A – U, G – C (các đoạn polynucleotid mạch đơn có trình tự bổ sung). Xác định được hàm lượng và độ dài của mRNA. Xác định và so sánh mức độ biểu hiện của các gen khác nhau ở các loại tế bào, mô và cơ quan khác nhau của cùng một cơ thể trong cùng một giai đoạn hoặc ở các giai đoạn khác nhau của quá trình phát triển cơ thể. Southern blot Northern blot Xác định trình tự DNA Xác định trình tự RNA Sử dụng enzym cắt giới hạn Không sử dụng enzym cắt giới hạn Biến tính bằng dung dịch kiềm tính Biến tính bằng formaldehyde Lai DNA – DNA Lai RNA – RNA hoặc RNA - .