tailieunhanh - Di truyền phân tử part 3

Tham khảo tài liệu 'di truyền phân tử part 3', tài liệu phổ thông, sinh học phục vụ nhu cầu học tập, nghiên cứu và làm việc hiệu quả | Foreign DNA fcoRI Decameric linker molecule T4 DNA ligase Linker molecules Voclor Hỉnh 2 9 Phân tứ decameric có chứa vùng mục tiều EcoRỉgdn với T4 DNA ligase ở cá hai đầu của phán tứ DNA. Đầu sticky đứợc tạo ra nhà EcoRỈ. Phân tử ĐNA này có thễ được gắn vào mộtvectơ được xứ lý cùng một loại restriction endonuclease Kỹ thuật này cho đến nay vẫn đứợc xem có vai trò quạn trọng trong công nghệ recombinant DNA nhất là trong kỹ thuật DNA sequencing đọc mã di truyền JDNA được thảo luận ỏ phần sau. Nó còn được áp dụng trong việc nối lại hai đoạn DNA hoặc tạo ra những vectơ có tính chất thể hiện expression vector . . Kết nổi các phân tửDNA Enzyme ngoài chức năng phân cắt nó còn có chức năng kết nối các phân tử DNA. 57 . DNA ligase E coli và thực khuẩn thể T4 hình thành một hệ thống mật mã của một enzym đó là DNA ligase. Phản ling kết nói ligation được hoàn tất tạo ra một thể lai mỏi giữa vectơ và DNA mục tiêu được gọi là recombinant . Quần thể của recombinant có thể gia tăng nhò phẫn ứng ỏ nồng độ cao cúa phân tủ DNA Ferretti và Sgaramella 1981 . xử lý cho vectơ plasmid ổ dạng dây thẳng vổi alkaline phosphatase nhằm đẩy ra đầu 5 của góc phosphate người ta có thể ngăn ngừa được cả hai hiện tượng tái lập lại chu kỳ vả thành lập dạng dimer của plasmid hình 2-6 và 2-7 . . Thể double linker Vectơ plasmid có một loạt vị trí xác định cho kỹ thuật cloning nhân bản vô tính . Thí dụ như vectơ pUC8. Vectơ này được dùng để tạo dòng vô tính phân tử cDNA dây đôi nhờ phương pháp có thuật ngữ là double linker Kurtz vả Nicodemus 1981 Helfman và ctv. 1983 trong đó các phân tử linker khác nhau được thêm vào đầu đói diện của cDNA hỉnh 2-10 . . Thể adaptor Trong tníòng hợp restriction enzyme được dùng để tạo ra đầu dây kiểu sticky của thể linker nó cũng có thể phân cắt DNA mục tiêu tại các vị trí tương ứng bên trong. Như vậy DNA sẽ được tạo dòng thành hai hoặc nhiều đoạn phụ subfragment . Ngưòi ta đề nghị một giải pháp là chọn một restriction enzyme khác nhưng không .