tailieunhanh - PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ GIẤY

Phương pháp sắc ký giấy, cũng như phương pháp sắc ký lớp mỏng, được áp dụng trong kiểm nghiệm chất lượng thuốc để định tính, thử tinh khiết, bán định lượng và định lượng. Sự tách các chất bằng phương pháp sắc ký giấy dựa chủ yếu trên sự khác nhau về hệ số phân bố của chúng giữa hai pha lỏng: Một pha tĩnh và một pha động. Pha tĩnh ở đây là nước có sẵn trong sợi celulose của giấy, hoặc thành phần thân nước từ hỗn hợp dung môi của pha động được hút chọn lọc. | PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ GIẤY Phương pháp sắc ký giấy cũng như phương pháp sắc ký lớp mỏng được áp dụng trong kiểm nghiệm chất lượng thuốc để định tính thử tinh khiết bán định lượng và định lượng. Sự tách các chất bằng phương pháp sắc ký giấy dựa chủ yếu trên sự khác nhau về hệ số phân bố của chúng giữa hai pha lỏng Một pha tĩnh và một pha động. Pha tĩnh ở đây là nước có sẵn trong sợi celulose của giấy hoặc thành phần thân nước từ hỗn hợp dung môi của pha động được hút chọn lọc vào giấy. Pha động là một hệ dung môi thích hợp cho sự tách đã được quy định trong các chuyên luận. Mức độ di chuyển của một chất được đặc trưng bởi hệ số di chuyển Rf và tính bằng tỷ lệ giữa khoảng cách di chuyển của chất đó và khoảng cách di chuyển của dung môi Rf a b. Trong đó a là khoảng cách di chuyển của chất phân tích b là khoảng cách di chuyên của dung môi. Giá trị Rf bao giờ cũng nhỏ hơn 1. Trong trường hợp sắc ký liên tục không còn xác định được giới tuyến của dung môi người ta dùng hệ số di chuyên Rr. Rr là tỷ số giữa khoảng cách di chuyên của chất phân tích và khoảng cách di chuyên của chất dùng làm chuẩn so sánh. Giá trị Rr có thê nhỏ hơn hay lớn hơn 1. Cách tiến hành Chuẩn bị bình sắc ký Bình sắc ký là những bình thủy tinh hình trụ hoặc hình hộp dẹt có kích thước thích hợp có nắp đậy kín. Nắp có lỗ ở giữa đê lắp bình gạn có khoá đựng dung môi. Trong bình có các giá đê máng đựng dung môi và treo giấy sắc ký được thiết kế thích hợp cho kiêu sắc ký đi lên hay sắc ký đi xuống. Chuẩn bị dung môi Thành phần và tỷ lệ các hệ dung môi được quy định trong các chuyên luận. Việc trộn các thành phần được tiến hành trong bình gạn sau khi lắc đều đê yên. Nếu có tách lớp thì gạn lấy lớp pha thân nước thường là lớp dưới làm dung môi pha tĩnh đê bão hoà giấy sắc ký sau khi đã chấm các chất phân tích còn lớp trên dùng làm dung môi pha động. Nếu dung môi không tách lớp thì dùng chính dung môi đó đê bão hoà giấy sắc ký. Chuẩn bị giấy Giấy sắc ký là loại giấy đặc biệt dành riêng cho sắc ký có bề dày thích