tailieunhanh - Các quá trình và thiết bị công nghệ sinh học : MÁY ĐIỆN DI part 2

Nhanh, điện áp cao Những ứng dụng nào đó, như là kiểm tra các mẫu, có thể thực hiện nhanh dưới điều kiện điện áp cao. Làm lạnh (−200C ) và giới hạn thời gian vận hành 5 phút hoặc ít hơn ở điện áp 500 V. Chậm hơn, điện áp cao hơn Một gradient điện áp 12V/cm (150V) trong 30 ÷ 40 phút (sử dụng dung dịch đệm 1% gel agaroza và 0,5 X TBE) cắt Hind III của lamda ADN thành các đoạn 0,1 ÷ 23 kb | Nhanh điện áp cao Những ứng dung nào đó như là kiểm tra các mẫu co thể thực hiện nhanh dưổi điều kiện điện áp cao. Làm lanh -200C và giói han thòi gian vẫn hành 5 phut hoặc ít hơn ò điện àp 500 V. Chậm hơn điện áp cao hơn Một gradient điện àp 12V cm 150V trong 30 40 phut sứ dung dung dịch đệm 1 gel agaroza và 0 5 X TBE cặt Hind III cua lamda ADN thành càc đoan 0 1 23 kb. Hoặc dung dung dịch như vẫy mẫu này co thệ7 chay ơ 24 V cm 300V thì co thệ7 phẫn cặt trong 20 30 phut. Làm lanh thiệt bị trứơc khi tiện hành. Chu y - Nệu khộng độ7 thệm màu vào chẫt long làm nguội thì đặt trện nện tội đệ7 quan sàt dệ dàng hơn. - Đặt thiệt bị con nong lện nện được làm lanh co thệ7 ành hương đện nhiệt độ xung quanh. Nệu sư quà nhiệt khộng đươc kiệm soàt gel se tan hoặc thiệt bị se cong. - Etydi bromua là chẫt ặn dà manh nện cẫn mang bao tay. - Đeo kính chặn tia UV và bào vệ da khi sư dung đen UV. - Tính gradient điện àp chia điện àp đặt vào cho khoàng càch giưa càc cực 12 7 cm. Bang . Điện àp đặt vào và thời gian đề nghị 1 Điện áp V Gradient V cm Thòi gián phút 500 40 5 1 400 31 10 1 300 24 20 1 200 16 30 40 150 12 30 60 Ghi chú 1 Đệ7 thơi gian chay ít hơn hoặc bặng 20 phut sư dung 0 5X TBE và làm lanh nện đện -200C trươc khi sư dung. Sau khi phận ly 1- Ngặt điện thào dẫy dẫn thào nặp. 2- Nệu khộng thệm etydi bromua vào gel hoặc mẫu trươc khi chay nhuộm gel trong dung dịch 0 5 1 mg ml etydi bromua trong nươc hoặc đệm. 3- Làm sach thiệt bị. 327 Vận hành Các loại gel agaroza được chuẩn bị lần đầu trong khuôn đúc gel. Những mẫu được nạp váo trong các bể chữa vá được phần ly. Thuôc nhuôm huỳnh quang C12H2oBrN3 co thể được thêm vao chầt đệm điện di hoặc gel hoặc ca hai để tìm ra dầu hiệu cua qua trình phần ly. Sau khi điện di gel co thệ7 cho mau ghi lai mau thầm mau thêm hoặc sầy tư đông. - Đô đầy lô vỢi chầt tai lanh. Du không lam lanh đi nưa thì điêu quan trong la phai đô đầy lô vỢi dung dịch lam lanh đặc trưng trưỢc khi sư dung vì dung dịch cung cầp nguôn nhiệt cần thiệt. Chuần bị