tailieunhanh - Giáo trình Nucleic Acid part 9

III. Mã di truyền Gene (DNA) được cấu tạo từ bốn loại nucleotide, trong khi đó protein được cấu tạo bởi 20 loại amino acid. Vấn đề đặt ra là, các gene mã hóa cho các sản phẩm protein của chúng bằng cách nào? Bằng suy luận, ta có thể suy đoán rằng mỗi amino acid không thể được xác định bởi đơn vị mã gồm một, hai hoặc bốn nucleotide bởi một đằng còn chưa đủ và một đằng khác lại quá dư thừa. Có lẽ nó phải là một nhóm gồm ba nucleotide (43 = 64). . | 132 III. Mã di truyền Gene DNA được cấu tạo từ bốn loại nucleotide trong khi đó protein được cấu tạo bởi 20 loại amino acid. Vấn đề đặt ra là các gene mã hóa cho các sản phẩm protein của chúng bằng cách nào Bằng suy luận ta có thể suy đoán rằng mỗi amino acid không thể được xác định bởi đơn vị mã gồm một hai hoặc bốn nucleotide bởi một đằng còn chưa đủ và một đằng khác lại quá dư thừa. Có lẽ nó phải là một nhóm gồm ba nucleotide 43 64 . Với 64 kiểu bộ ba hoá ra là đủ thừa để mã hoá cho 20 loại amino acid. Như thế một amino acid được xác định bởi trung bình ba bộ ba khác nhau. Vậy phải chăng mã di tryền là mã bộ ba Năm 1961 và đã phân tích chi tiết nhiều thể đột biến của phage T4 nhận được bằng cách xử lý acridin tác nhân gây các đột biến mất hoặc thêm một cặp base đã khẳng định mã di truyền là mã bộ ba triplet code đúng như dự đoán. Như vậy đơn vị mã coding unit gồm ba nucleotide xác định một amino acid gọi là codon. 1. Giải mã di truyền Việc tiếp theo là xác định xem mỗi amino acid cụ thể được mã hoá bởi một hoặc một số bộ ba nào. Cũng trong năm 1961 và H. Matthaei lần đầu tiên sử dụng mRNA nhân tạo có thành phần base biết trước được tổng hợp bằng enzyme polynucleotide phosphorylase do Ochoa tìm ra năm 1959 và hệ thống tổng hợp là dịch chiết tế bào E. coli bao gồm đầy đủ các yếu tố ribosome tRNA amino acid enzyme ATP. cần thiết cho tiến hành giải mã di truyền in vitro. Với mRNA chỉ chứa toàn U poly U chuỗi polypeptide sinh ra chỉ chứa toàn phenylalanine Phe . Điều đó chứng tỏ UUU là bộ ba mã hoá của Phe. Sau đó Har Gobind Khorana đã tiến hành các thí nghiệm sử dụng các mRNA tổng hợp có chứa hai ba hoặc bốn nucleotide được kết nối theo kiểu lặp lại để tiến hành giải mã. Ví dụ i Với mRNA nhân tạo chứa hai base là poly UC hay UCUCUC. sẽ chứa hai codon xen kẽ UCU và CUC chú ý rằng sự dịch mã in vitro khởi đầu tại vị trí ngẫu nhiên . Kết quả là thu được một polypeptide gồm hai amino acid xen kẻ nhau là serin và leucin poly .