tailieunhanh - CNSHDV: Nuôi cấy tế bào Động vật

• Có 2 kiểu TB: - TB phụ thuộc vào chỗ neo để bám dính: Bám vào đáy bình nuôi cấy và tạo thành lớp đơn bao phủ toàn bộ bề mặt vật thể nuôi cấy (confluence) - TB không phụ thuộc vào chỗ neo (là những TB kết hợp với dịch lỏng trong cơ thể, ví dụ: TB máu) | Chương 4. Nuôi cấy tế bào động vật Dụng cụ nuôi cấy: - Bình flask đơn giản - Máy lên men phức tạp có màn hình điều khiển Kỹ thuật nuôi cấy tế bào động vật Môi trường nuôi cấy: Glucose Nước Amino acid Các muối Điều kiện nuôi cấy: - Khí oxy - Khí CO2 Huyết thanh ĐV: Thường dùng là FBS Cần thiết cho sự phát triển của TB ĐV Bổ sung 5 - 10% vào môi trường nuôi cấy TB Chất chỉ thị dùng bổ sung vào môi trường nuôi cấy TB ĐV: phenol red Các chất thải từ TB làm thay đổi pH môi trường Môi trường thay đổi từ đỏ sang vàng Kiểm soát nhiệt độ và pH: - OC - pH Phương pháp đo sự phát triển của TB ĐV: - Đếm TB bằng buồng đếm hồng cầu - Đo mật độ quang bằng máy quang phổ Khử trùng bằng: Bổ sung kháng sinh vào môi trường nuôi cấy Lọc vô trùng Hấp khử trùng dụng cụ Có 2 kiểu TB: TB phụ thuộc vào chỗ neo để bám dính: Bám vào đáy bình nuôi cấy và tạo thành lớp đơn bao phủ toàn bộ bề mặt vật thể nuôi cấy (confluence) TB không phụ thuộc vào chỗ neo (là những TB kết hợp với dịch lỏng trong cơ thể, ví | Chương 4. Nuôi cấy tế bào động vật Dụng cụ nuôi cấy: - Bình flask đơn giản - Máy lên men phức tạp có màn hình điều khiển Kỹ thuật nuôi cấy tế bào động vật Môi trường nuôi cấy: Glucose Nước Amino acid Các muối Điều kiện nuôi cấy: - Khí oxy - Khí CO2 Huyết thanh ĐV: Thường dùng là FBS Cần thiết cho sự phát triển của TB ĐV Bổ sung 5 - 10% vào môi trường nuôi cấy TB Chất chỉ thị dùng bổ sung vào môi trường nuôi cấy TB ĐV: phenol red Các chất thải từ TB làm thay đổi pH môi trường Môi trường thay đổi từ đỏ sang vàng Kiểm soát nhiệt độ và pH: - OC - pH Phương pháp đo sự phát triển của TB ĐV: - Đếm TB bằng buồng đếm hồng cầu - Đo mật độ quang bằng máy quang phổ Khử trùng bằng: Bổ sung kháng sinh vào môi trường nuôi cấy Lọc vô trùng Hấp khử trùng dụng cụ Có 2 kiểu TB: TB phụ thuộc vào chỗ neo để bám dính: Bám vào đáy bình nuôi cấy và tạo thành lớp đơn bao phủ toàn bộ bề mặt vật thể nuôi cấy (confluence) TB không phụ thuộc vào chỗ neo (là những TB kết hợp với dịch lỏng trong cơ thể, ví dụ: TB máu) Confluence tối ưu để chuyển TB sang đĩa mới là 70-80% Có 2 dạng TB ĐV được nuôi cấy: - TB nuôi cấy sơ cấp: tách ra từ mô mới, vòng đời nuôi cấy bị giới hạn, được xử lý bằng trypsin để tách thành những TB đơn như TB biểu bì, nguyên bào sợi - Dòng TB liên tục: được biến nạp làm mất đi tính nhạy đối với các nhân tố kiểm soát sự phát triển, tạo ra những dòng TB bất tử, được tạo hình lại; dễ nuôi cấy hơn TB sơ cấp Số thế hệ TB: số lần TB được tách chuyển (“split”) từ đĩa và nuôi cấy sang đĩa khác Các điều kiện nuôi cấy TB ĐV Đệm phosphate không có Ca2+ Mg2+ (PBS) được dùng để rửa và loại bỏ huyết thanh trong môi trường tránh ức chế chức năng của Trypsin-EDTA. - Calcium cũng ức chế chức năng của Trypsin-EDTA. - Phải làm ấm trước khi sử dụng để TB không bị sốc bởi dung dịch lạnh Enzym dùng để tách TB khỏi đĩa nuôi cấy là trypsin: Trypsin cắt nối peptid (LYS hoặc ARG) trong fibronectin của chất nền ngoại bào. EDTA nối với ion calcium trong môi trường Trypsin sẽ tự phân hủy và mất

• Sinh học
• giáo trình di truyền học
• toán di truyền
• phương pháp giải nhanh sinh học
• phương pháp học môn sinh
• tài liệu ôn thi sinh học
• Di truyền học
• Di truyền học quần thể
• Di truyền học phân tử
• Di truyền học cổ điển
• Di truyền tế bào chất
• Di truyền học người
• Di truyền học tiến hóa
• Ứng dụng của di truyền học
• Di truyền học đại cương
• Giáo trình Di truyền học đại cương
• Di truyền học Mendel
• Di truyền học ở người
• Cơ sở di truyền học của Mendel
• Di truyền nhiễm sắc thể
• Vật chất di truyền
• Giáo trình
• công nghệ Di truyền
• kỹ thuật Di truyền
• phương pháp Di truyền
• bài giảng Di truyền học
• tài liệu Di truyền học
• sinh học
• hướng dẫn di truyền học
• tìm hiểu di truyền
• di truyền
• giáo trình Di truyền Y học
• bài giảng Di truyền Y học
• tài liệu Di truyền Y học
• lý thuyết Di truyền Y học
• đề cương Di truyền Y học
• Di truyền học động vật
• Cơ sở di truyền động vật
• Di truyền tế bào
• Di truyền tế bào động vật
• Di truyền hóa sinh
• kỹ thuật di truyền học
• đề cương di truyền học
• phương pháp di truyền học