tailieunhanh - BÁO CÁO KHOA HỌC: "NGHIÊN CỨU ĐA HÌNH MỘT SỐ GIỐNG TẰM DÂU BẰNG KỸ THUẬT RAPD"

Ngày nay, việc sử dụng các chỉ thị phân tử ADN về đa hình các đoạn ADN nhân ngẫu nhiên-RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA), đa hình độ dài các đoạn cắt giới hạn-RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism), sự lặp lại các chuỗi đơn giản-SSR (Simple Sequence Repeats) hay còn gọi là tiểu vệ tinh (Microsatellite) để phân loại, nghiên cứu đa dạng sinh học của động vật. | NGHIÊN CỨU ĐA HÌNH MỘT SỐ GIỐNG TẰM DÂU BẰNG KỸ THUẬT RAPD Nguyễn Thị Thanh Bình Hoàng Thị Hằng Nông Văn Hải Viện Công nghệ Sinh học I. MỞ ĐẦU Ngày nay việc sử dụng các chỉ thị phân tử ADN về đa hình các đoạn ADN nhân ngẫu nhiên-RAPD Random Amplified Polymorphic DNA đa hình độ dài các đoạn cắt giới hạn-RFLP Restriction Fragment Length Polymorphism sự lặp lại các chuỗi đơn giản-SSR Simple Sequence Repeats hay còn gọi là tiểu vệ tinh Microsatellite để phân loại nghiên cứu đa dạng sinh học của động vật thực vật và vi sinh vật ngày càng phổ biến trên thế giới và ở Việt Nam 4 5 7 8 . So sánh với phương pháp truyền thống phân loại và nghiên cứu đa hình bằng chỉ thị phân tử cho kết quả có độ tin cậy cao 2 . Kỹ thuật RAPD do William và cs 1990 8 phát triển trên cơ sở PCR sử dụng một số đoạn mồi ngẫu nhiên. Kỹ thuật này đã được ứng dụng kết hợp cùng với một số kỹ thuật khác để phân loại nghiên cứu quan hệ di truyền giữa các cá thể tằm dâu 1 2 5 10 11 . Ở Việt Nam chưa có công trình nào đề cập tới vấn đề này mặc dù nghề nuôi tằm là một trong những nghề truyền thống của đất nước hiện đang được đẩy mạnh phát triển việc phân loại đánh giá đa hình vẫn dựa vào các đặc điểm sinh học và hình thái cho nên còn có những hạn chế nhất định. Trong bài báo này chúng tôi xin trình bày một số kết quả về sử dụng kỹ thuật RAPD nghiên cứu đa hình một số giống tằm dâu nuôi tại Việt Nam. II. NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 1. Nguyên liệu Mẫu nghiên cứu gồm tám giống tằm đang được dùng tại các tỉnh phía Bắc Việt Nam TTB TML VC ĐS 1 ĐS 2 BM THT VYD trong đó có bốn giống được sử dụng nhiều trong vài năm gần đây đó là hai giống địa phương thuộc tập đoàn gốc đa hệ vàng chấm VC và Đồ Sơn ĐS hai giống tằm lưỡng hệ trắng Thái Bình TTB và trắng Mai Lĩnh TML . Tất cả các giống tằm trên do Trung Tâm Nghiên cứu Dâu Tằm Tơ Trung Ương Xí nghiệp Giống Tằm Cấp I Mai Lĩnh và Xí nghiệp Giống tằm Thái Bình cung cấp. Hoá chất EDTA Tris-HCl SDS Proteaza K RNaza chloroform phenol NaCl agaroza của các hãng Sigma Merck .