tailieunhanh - SẢN XUẤT VACXIN

Ngay sau khi phân lập và nuôi cấy được vi khuẩn uốn ván. Năm 1890, Behring và Kitasato đã chứng minh rằng : độc tố uốn ván có tính kháng nguyên tốt, tạo được đáp ứng miễn dịch phòng bệnh uốn ván. Thời gian này họ đã điều chế được huyết thanh kháng độc tố uốn ván ở súc vật dùng điều trị và phòng bệnh uốn ván. Năm 1924, Descombey là người đầu tiên dùng formalin khử độc độc tố uốn ván, đặt nền móng cho việc sản xuất giải độc tố uốn ván làm vacxin phòng uốn. | SẢN XUẤT VACXIN Ngay sau khi phân lập và nuôi cấy được vi khuẩn uốn ván. Năm 1890 Behring và Kitasato đã chứng minh rằng độc tố uốn ván có tính kháng nguyên tốt tạo được đáp ứng miễn dịch phòng bệnh uốn ván. Thời gian này họ đã điều chế được huyết thanh kháng độc tố uốn ván ở súc vật dùng điều trị và phòng bệnh uốn ván. Năm 1924 Descombey là người đầu tiên dùng formalin khử độc độc tố uốn ván đặt nền móng cho việc sản xuất giải độc tố uốn ván làm vacxin phòng uốn ván. Quá trình điều chế vacxin uốn ván việc đầu tiên là phát triển phương pháp nuôi cấy vi khuẩn uốn ván lấy độc tố từ độc tố mới tiếp tục các bước tiếp theo như khử tính độc tinh chế hấp phụ kháng nguyên vào tá chất thích hợp tạo thành vacxin đơn giá hoặc phối hợp với nhiều vacxin khác. Từ 1944 đến những năm 1960 việc sản xuất độc tố uốn ván chủ yếu sử dụng phương pháp lên men tĩnh Static culture hay gọi là phương pháp cổ điển. Người ta nuôi cấy vi khuẩn uốn ván trong các bình thủy tinh miệng rộng với môi trường kỵ khí thích hợp. Các chai nuôi cấy được đặt trong tủ ấm hoặc phòng ấm 36oC -37oC. Sau thời gian nhất định thường 4-5 ngày có tác giả để 8-14 ngày đến lúc tế bào ly giải độc tố giải phóng vào nước nổi môi trường nuôi cấy thu nhận độc tố bằng các phương pháp lọc. Năm 1947 Raynaud đưa ra khái niệm canh khuẩn non 1-3 ngày nuôi cấy là canh khuẩn chủ yếu chứa các tế bào chưa bị ly giải canh khuẩn như thế hầu hết lượng độc tố nằm trong tế bào. Năm 1951 cũng chính Raynaud đề xuất một phương pháp trích chiết độc tố trong tế bào uốn ván bằng cách cưỡng bức ly giải canh khuẩn non. Ông tập trung vi khuẩn bằng cách ly tâm canh khuẩn non và giữ chúng trong dung dịch muối NaCl 1M Na2CO3 0 1M ở 4oC 4 ngày sau đó để ở 35oC 2 ngày. Ly tâm lấy nước nổi xác định Lf ml bằng phản ứng lên bông. Độc tố thu được theo phương pháp của Raynaud có tác dụng gây miễn dịch trên ngựa tạo kháng thể. Phương pháp này đã được một số phòng thí nghiệm ứng dụng sản xuất độc tố lúc bấy giờ. Thời gian gặt lấy vi khuẩn thường là 72 giờ. .