tailieunhanh - Giáo trình : Kỹ thuật nhân giống in vitro part 4

A. radiobacter sản sinh kháng sinh đặc trưng (agrocin 84) ngăn cản tác hại của các loài Agrobacterium kể trên. Một số khối u do vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens tạo ra. A: một khối u rất lớn hình thành trên thân cây hoa Hồng, B: một dãy khối u nằm trên nhánh của cây Nho Trong đó nhóm A. tumefaciens được sử dụng nhiều nhất cho việc chuyển gen. Từ lâu người ta đã phát hiện hiện tượng hình thành các u ở thân khi cây bị nhiễm vi sinh vật đất A. tumefaciens qua các vết thương. Phân tích các. | Lốp Cây trểny 49C - Nhóm 4 Công nghị sinh hnc. nàng nghiỊp A. radiobacter sản sinh kháng sinh đặc trưng agrocin 84 ngăn cản tác hại của các loài Agrobacterium kể trên. Một số khối u do vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens tạo ra. A một khối u rất lớn hình thành trên thân cây hoa Hồng B một dãy khối u nằm trên nhánh của cây Nho Trong đó nhóm A. tumefaciens được sử dụng nhiều nhất cho việc chuyển gen. Từ lâu người ta đã phát hiện hiện tượng hình thành các u ở thân khi cây bị nhiễm vi sinh vật đất A. tumefaciens qua các vết thương. Phân tích các u cho thấy trong u có sự hình thành một số vật chất mới như nopaline octoine gọi chung là opine. Các chất này không tồn tại ở các cây bình thường khác. COO COO coo COO 1 1 c o 1 1 H3N- ọ H . H Ọ N NADPH H 1 H -C H 1 òh2 ch2 ch2 òh2 1 Òh2 1 ch2 ch2 ch2 óh3 ởh2 1 1 NADP ch2 1 Ct - keto - NH H NH glutarate h2n yiH Hjtr C JH arginine nopaline 31 Lốp Cây trểny 49C - Nhóm 4 Công nghị sinh hnc. nàng nghiỊp Điều đặc biệt là khối u không ngừng tăng trưởng kể cả khi đã diệt vi khuẩn. Điều này cho phép kết luận vi khuẩn đã chuyển vào cây tác nhân gây khối u dưới dạng vật chất di truyền. Khi xem xét các vi khuẩn A. tumefaciens chúng cũng giống các loại vi khuẩn thông thường khác là đều chứa các plasmid một dạng DNA vòng nằm ngoài nhiễm sắc thể vi khuẩn có khả năng nhân bản độc lập . Nhưng plasmid của A. tumefaciens có kích thước rất lớn. Các thực nghiệm cho thấy khi xử lý vết thương bằng vi khuẩn A. tumefaciens không mang plasmid thì không gây bệnh u và u chỉ xuất hiện khi xử lý vết thương bằng vi khuẩn có mang plasmid. Như vậy plasmid của A. tumefaciens chính là tác nhân gây bệnh. Chắc chắn plasmid này đã chuyển vào tế bào thực vật các vật chất di truyền gây bệnh u cho cây do vậy người ta gọi chúng là Ti-plasmid Tumor inducing plasmid . Ti-plasmid đã chuyển một đoạn DNA của Ti-plasmid nhập vào gen của cây. Ti-plasmid là một plasmid lớn với kích thước khoảng 200kb. Trên Ti-plasmid có đoạn T-DNA tumor DNA được giới hạn bằng bờ phải .