tailieunhanh - Luận văn: BƯỚC ĐẦU ỨNG DỤNG KỸ THUẬT SOUTHERN BLOT PHÂN TÍCH ĐA DẠNG DI TRUYÊN NẤM Magnaporthe grisea GÂY BỆNH ĐẠO ÔN TRÊN CÂY LÚA (part 3)

Đặt màng vào trong tủ sấy ở 65-800C trong khoảng 1 giờ cho đến khi các góc màng co lại là được. . Cố định DNA lên màng nitrocellulose Màng sau khi được làm khô, được đem xử lý dưới UV trong tủ GS GENE LINKER TM UV CHAMBER (Bio - Rad) trong 50 giây (chú ý bề mặt DNA của màng hướng lên). Sau đó, màng được đem ra để chuẩn bị lai (hoặc cũng có thể giữ lại trong hộp kín cho đến khi tiến hành lai). . Thực hiện lai Southern sử dụng probe pMGY-SB. | 26 - Đặt màng vào trong tủ sấy ở 65-800C trong khoảng 1 giờ cho đến khi các góc màng co lại là được. . Cố định DNA lên màng nitrocellulose Màng sau khi được làm khô được đem xử lý dưới UV trong tủ GS GENE LINKER TM UV CHAMBER Bio - Rad trong 50 giây chú ý bề mặt DNA của màng hướng lên . Sau đó màng được đem ra để chuẩn bị lai hoặc cũng có thể giữ lại trong hộp kín cho đến khi tiến hành lai . . Thực hiện lai Southern sử dụng probe pMGY-SB . Thực hiện phản ứng lai Trước khi thực hiện phản ứng lai xác lập nhiệt độ của buồng lai là 550C đồng thời làm nóng dung dịch đệm lai ở 55 0C. Song song đó chúng tôi tính toán các thông số sau Diện tích màng 20 x 12 240 cm2 Thể tích đệm lai x 240 48 ml Nồng độ probe cần 10 x 48 480 ng Thể tích probe 480 10 48 pl Qui trình thực hiện phản ứng lai Bước 1 Tiền lai Khi nhiệt độ của buồng lai đạt ổn định ở 55 0C và dung dịch đệm lai cũng đã được làm nóng đến 55 0C tiến hành rửa ống lai bằng nước cất vô trùng sau đó bơm vào ống lai 40 ml dung dịch đệm lai. Dùng kẹp đặt màng vào ống lai sao cho bề không có DNA tiếp xúc với thành ống lai. Thời gian cho bước này là 15 phút. Bước 2 Lai Trộn 8 ml dung dịch đệm lai với 48 pl probe bơm hỗn hợp vào giữa ống lai tránh nhỏ trực tiếp lên màng phản ứng được thực hiện trong một thời gian dài có thể để phản ứng qua đêm là phù hợp nhất 12 giờ . . Rửa màng nitrocellulose sau khi lai Trước khi rửa màng cần làm nóng dung dịch rửa 1 primary wash buffer đến 550C. Thực hiện rửa màng theo các bước sau 27 - Loại bỏ dung dịch đệm lai thêm vào ống lai khoảng 20 ml dung dịch rửa 1. Nhiệt độ và số vòng quay của buồng lai giống như khi lai thời gian rửa là 10 phút. - Lặp lại bước trên cũng trong 10 phút. - Loại bỏ dung dịch rửa 1 dùng kẹp gấp màng ra và cho vào hộp nhựa sạch với bề có DNA nằm trên. Cho vào đó dung dịch rửa 2 secondary wash buffer khoảng 50 ml lắc nhẹ ở nhiệt độ phòng trong 10 phút. - Lặp lại bước trên trong 10 phút. Lúc này màng có thể được giữ trong dung dịch rửa 2 .

• Công nghệ - Môi trường
• cách làm luận văn
• cách trình bày luận văn
• hướng dẫn làm luận văn
• luận văn ngành công nghệ sinh học
• phòng bệnh cho cây lúa
• Cách làm bài tập làm văn nghị luận
• Bài tập làm văn nghị luận
• Văn nghị luận
• Bài tập thực hành làm bài văn nghị luận
• Bài tập làm văn
• Đề văn nghị luận mẫu
• Lập dàn ý văn nghị luận
• Tìm hiểu đề văn nghị luận
• Nghị luận xã hội
• tóm tắt luận văn
• cách trích dẫn
• mẫu bìa luận văn
• hướng dẫn quy cách
• mẹo làm luận văn
• luận văn
• nghiên cứu khoa học
• Hướng dẫn cách viết luận văn khoa học
• cách viết luận văn
• kinh nghiệm viết luận văn
• luận văn khoa học
• tài liệu luận văn
• giáo trình luận văn
• bí quyết làm luận văn
• phương pháp làm luận văn
• Giải pháp tạo việc làm
• việc làm cho nông dân
• kỹ năng làm luận văn
• cách làm báo cáo tốt nghiệp
• báo cáo ngành kinh tế nông nghiệp
• luận văn thạc sĩ kinh tế
• luận văn ngành nông nghiệp
• luận văn ngành phát triển nông thôn
• cách làm luận văn luận văn ngành phát triển nông thôn
• chất kháng nguyên
• môi trường nuôi cấy sinh vật
• Giáo án Ngữ văn 11 tuần 5
• Giáo án điện tử Ngữ văn 11
• Giáo án điện tử lớp 11
• Giáo án lớp 11 môn Ngữ văn
• Viết bài làm văn số 2
• Nghị luận văn học
• Cách làm bài văn nghị luận
• Kỹ năng làm báo cáo
• cách làm báo cáo
• luận văn mẫu
• “Giáo dục truyền thống cách mạng
• truyền thống Đoàn Đội
• Cách làm báo cáo khoa học
• Trình bày văn bản
• Cách làm tiểu luận
• Hình thức trình bày luận văn
• Hình thức trình bày đồ án