tailieunhanh - Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 9

Cân 20 mg IPTG (dạng bột) hoà tan trong 1 ml nƣớc khử ion, sau đó lọc qua màng lọc có kých thƣớc lỗ 0,2μm Dung dịch kháng sinh Ampicillyn 100mg/ml Cân 100mg ampicillyn dạng bột, hoà tan trong 1ml nƣớc khử ion, lọc qua màng lọc có kých thƣớc lỗ 0,45μm. Các loại buffer PCR buffer 10X Tris-HCl pH (NH4)2SO4 MgCl2 DTT NP 40 Tween-20 200mM 166mM 67mM 100mM 0,1% 0,1% | Cân 20 mg IPTG dạng bột hoà tan trong 1 ml nước khử ion sau đó lọc qua màng lọc có kých thước lỗ 0 2gm Dung dịch kháng sinh Ampicillyn 100mg ml Cân 100mg ampicillyn dạng bột hoà tan trong 1ml nước khử ion lọc qua màng lọc có kých thước lỗ 0 45 gm. Các loại buffer PCR buffer 10X Tris-HCl pH NH4 2SO4 MgCl2 200mM 166mM 67mM DTT 100mM NP 40 0 1 Tween-20 0 1 Buffer SuRE 10X pH buffer enzym cắt Tris-HCl 100mM NaCl 1M MgCl2 2-Mercaptoethanol 50mM 10mM NEBuffer 1X pH buffer của enzym DNA polymerase I large fragment NaCl 50mM Tris-HCl 10mM MgCl2 10mM DTT 1mM Lygation buffer 10X Tris-HCl pH MgCl2 660mM 66mM DTT 100mM ATP 660gM 65 cak hl I p Bluescript II SK - Multi pl 9 Cloning Site Region sequence shown 59 8 s 26 icoOiavi fafi Ij I I VFiundv Kail jjal Sell Ĩ7G7 AAAACGACGGCCAfl dAGCGCGCG7 AA7 AEGAC7CAC7A7 ABMMÀATÌGGGĨACCGGGCCCCCCC7 CGAGG7CGAC . Ml 3 .JC p mw bi-d I pnmir andriq ih is F r - jlSl -jndll cK - ak hl I - I tj nlll Sp. I H l I j-51 So I See . KrArCGA7AAGC7TGATArCGAAT7CC7GMGCCCGGGGGA7CCACTAG7TC7AGAGCGGCCGCMCCGCGG7GGAGCTC. .Ks p-ini ki-dnq -il 5K 3 mn trcing nil T3 PờílHúlúr II . .CAGCnTrGT7CCCrr7AGrGAGŨG77AAr7GCŨCGCr7GGCG7AATtìAĩGG7CA7AGCrGTT7CC 3 prim I b 5 Faalure Nudsodide Position J arigir cl DMA repliaat on pũlue ripl Sk 4 1 or Ị 125 441 11 Ị- DÓgir aí ss DMA replioat or pBluestjipl 5K l-j 01 21 327 ỉ galada aasea IrajTierl ooc ig íBq J roe lacZ l JỂtìJlẾ nulliple doling 5 le á 53 76Ũ T7 proincle liaiìíciiplion miiclnr 5Ìe 643 13 promt le liaiiíciiplion ni erior sìe 771 lac prai icler ai Ỳ3B pUC arigir cl replioat 01 USB 1B25 ampicillin eíisiarce bla ù 1976 2333 Figure I lie esoipt I SK 1 j phngemid vedon. The complete st J J DICE Old lid of resiridioi silts ara crrailable cl wwi .shukgentjzun. Genbank ÍX5232 Sli f Old X52330 1 - - Hình 1 Sơ đồ cấu trúc pBluescript II SK - 66 17 PhủlíMlủr pBluescripi II KS - Multiple cloning Site Region sequence shown 598-82Ó ĨTGĨAAAACGAlCGGCCAG GAGCGCŨCGr AATAEGACrCACĨAĨAGGGI .