Kinh doanh - Marketing
Kinh tế quản lý
Biểu mẫu - Văn bản
Tài chính - Ngân hàng
Công nghệ thông tin
Tiếng anh ngoại ngữ
Kĩ thuật công nghệ
Khoa học tự nhiên
Khoa học xã hội
Văn hóa nghệ thuật
Sức khỏe - Y tế
Văn bản luật
Nông Lâm Ngư
Kỹ năng mềm
Luận văn - Báo cáo
Giải trí - Thư giãn
Tài liệu phổ thông
Văn mẫu
Giới thiệu
Đăng ký
Đăng nhập
Tìm
Danh mục
Kinh doanh - Marketing
Kinh tế quản lý
Biểu mẫu - Văn bản
Tài chính - Ngân hàng
Công nghệ thông tin
Tiếng anh ngoại ngữ
Kĩ thuật công nghệ
Khoa học tự nhiên
Khoa học xã hội
Văn hóa nghệ thuật
Y tế sức khỏe
Văn bản luật
Nông lâm ngư
Kĩ năng mềm
Luận văn - Báo cáo
Giải trí - Thư giãn
Tài liệu phổ thông
Văn mẫu
Thông tin
Điều khoản sử dụng
Quy định bảo mật
Quy chế hoạt động
Chính sách bản quyền
Giới thiệu
Đăng ký
Đăng nhập
0
Trang chủ
Khoa Học Tự Nhiên
Sinh học
Cloning 101: A Primer
tailieunhanh - Cloning 101: A Primer
Once you have your restriction enzymes chosen, it is time to design the final complete gene The multiple cloning site (or whatever plasmid you are cloning into) should already have the 5’ portion of the gene intact (. RBS, spacer, Met) Sequences must be in frame | Ghosh Lab University of Arizona Department of Chemistry Cloning 101: A Primer Outline Cloning overview pDRAW32 Design Gene Insert Primers Further considerations (optimization of the process) Transformation Cloning Overview Four main steps in cloning: Insert synthesis Restriction enzyme digest Ligation Transformation + Functional construct Plasmid (vector) Insert (your gene) Design Overview Steps to follow in designing your cloning experiment: Design your gene Design your insert Pick your enzymes Check your design Recheck your design Functional construct All of the important information in one place! pDRAW32 Plasmid maps: pDRAW32 pDRAW32 You can look at the sequence in detail Open reading frames Translation Restriction sites Complementary strand Design of the Gene Example, the gene we want: G C D R A S P Y C G We got this from phage display: ggctgcgacagggcgagcccgtactgcggt G C D R A S P Y C G Phage sequence Final sequence for the gene of interest: ggctgcgacagggcgagcccgtactgcggttaa G C D | Ghosh Lab University of Arizona Department of Chemistry Cloning 101: A Primer Outline Cloning overview pDRAW32 Design Gene Insert Primers Further considerations (optimization of the process) Transformation Cloning Overview Four main steps in cloning: Insert synthesis Restriction enzyme digest Ligation Transformation + Functional construct Plasmid (vector) Insert (your gene) Design Overview Steps to follow in designing your cloning experiment: Design your gene Design your insert Pick your enzymes Check your design Recheck your design Functional construct All of the important information in one place! pDRAW32 Plasmid maps: pDRAW32 pDRAW32 You can look at the sequence in detail Open reading frames Translation Restriction sites Complementary strand Design of the Gene Example, the gene we want: G C D R A S P Y C G We got this from phage display: ggctgcgacagggcgagcccgtactgcggt G C D R A S P Y C G Phage sequence Final sequence for the gene of interest: ggctgcgacagggcgagcccgtactgcggttaa G C D R A S P Y C G * Add a stop codon If you are cloning out of a known plasmid, just use the sequence that you have Design of the Gene If you are designing the gene from scratch, keep in mind codon usage Not all codons are created equal Un-optimized codons could lead to lower expression levels The codon usage reflects levels of tRNA available in E. Coli Pay attention to the stop codons too (XL1-Blues read through TAG {amber stop codon} 20% of the time) or preferably What if we don’t have the DNA sequence? Design from scratch! (don’t forget about codon usage) Endonucleases (or restriction enzymes) are enzymes which cut DNA at specific internal recognition sequences Compare to exonucleases, which cut from one end You must choose restriction sites that are available in the plasmid you are cloning into They must not appear in your gene (silent mutation can remove unwanted .
Kim Sa
52
34
ppt
Báo lỗi
Trùng lắp nội dung
Văn hóa đồi trụy
Phản động
Bản quyền
File lỗi
Khác
Upload
Tải xuống
đang nạp các trang xem trước
Không thể tạo bản xem trước, hãy bấm tải xuống
Tải xuống
TÀI LIỆU LIÊN QUAN
Principles of degital design
458
91
0
Digital design Principles of modern digital design
438
87
0
Design Creativity 2010
330
69
0
Lecture Chapter 9: Moving to design
7
95
0
Lecture RTL hardware design - Chapter 9: Sequential circuit design
82
84
0
Lecture RTL hardware design - Chapter 13: Hierarchical design
58
77
0
Anchor rod design - Steel design guide 1
69
79
1
Lecture Top-Down Network Design - Chapter 14: Documenting Your Network Design
10
46
3
Hướng dẫn học OptiSys Design
87
106
0
Ebook The mechanical design process (4th edition): Part 1
185
77
0
TÀI LIỆU XEM NHIỀU
Một Case Về Hematology (1)
8
461916
55
Giới thiệu :Lập trình mã nguồn mở
14
22915
64
Tiểu luận: Tư tưởng Hồ Chí Minh về xây dựng nhà nước trong sạch vững mạnh
13
10961
531
Câu hỏi và đáp án bài tập tình huống Quản trị học
14
10150
450
Phân tích và làm rõ ý kiến sau: “Bài thơ Tự tình II vừa nói lên bi kịch duyên phận vừa cho thấy khát vọng sống, khát vọng hạnh phúc của Hồ Xuân Hương”
3
9557
104
Ebook Facts and Figures – Basic reading practice: Phần 1 – Đặng Tuấn Anh (Dịch)
249
8346
1127
Tiểu luận: Nội dung tư tưởng Hồ Chí Minh về đạo đức
16
8271
423
Mẫu đơn thông tin ứng viên ngân hàng VIB
8
7883
2224
Đề tài: Dự án kinh doanh thời trang quần áo nữ
17
6786
255
Giáo trình Tư tưởng Hồ Chí Minh - Mạch Quang Thắng (Dành cho bậc ĐH - Không chuyên ngành Lý luận chính trị)
152
5988
1441
TỪ KHÓA LIÊN QUAN
Sinh học
Design
Insert Primers
Cloning Overview
Design of the Gene
Blunt vs Sticky Ends
Principles of degital design
Principles degital design
Degital design
Digital design
Documentation digital design
Learn digital design
Method of digital design
logic design
web design
techniques for computer
optimization techniques
engineering design
design methods
design data
Design Creativity
Design Education
Design Image
Design Synthesis
Design Computing
Moving to design
Lecture Moving to design
Understanding the elements of design
Moving from analysis to design
Design and integrate the network
Design the application architecture
Sequential circuit design
RTL hardware design
Digital system design
Thiết kế hệ thống kỹ thuật số
Lecture RTL hardware design
Hardware design
Register transfer level
Hierarchical design
Steel design guide 1
Base plate and anchor rod design
Anchor rod design
Column base plate connections
Design examples
Design of column base plate connections
Lecture Top Down Network Design
Top Down Network Design
Bài giảng Thiết kế mạng
Documenting your network design
Documenting your design
Design requirements
Hướng dẫn học OptiSys Design
Cách sử dụng OptiSys Design
Làm quen với OptiSys Design
Cách sử dụng phần mềm OptiSys Design
Tìm hiểu về OptiSys Design
Tài liệu về OptiSys Design
The mechanical design process
Why study the design process
Understanding mechanical design
Designers and design teams
The design process
Planning for design
Lecture Game design
Bài giảng thiết kế Game
Hud and icon design
Heads up in game design
Health bar in game design
Icon in game design
Power Design 11
sử dụng Power Design 11
ứng dụng của Power Design 11
tài liệu về Power Design 11
các dùng Power Design 11
aircraft design
engine design
design drawings
aircraft engines
systems design
design planning
Systems Analysis
Design in a Changing World
Analysis objectives
design Objectives
Fashion design basics
Principles of fashion design
Fashion design elements
Fashion design presentation
Fashion design process
technology and living
Fashion design basic
Device Technologies
Principles digital design
Practice digital design
Combinational logic design practices
Sequential logic design pringciples
Software design
Software design and architecture
Software architecture
Software architectural design
Object oriented design
Software development
Software design methods
Engineering drawing
Lecture Engineering drawing and design
Engineering design process
Mechanical design process
Problem definition
Alternative solutions
Satellite hinge
Mechanical design
Preliminary design
Mechanical systems
TÀI LIỆU MỚI ĐĂNG
Báo cáo nghiên cứu khoa học " KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU BƯỚC ĐẦU VỀ THIÊN ĐỊCH CHÂN KHỚP TRÊN CÂY THANH TRÀ Ở THỪA THIÊN HUẾ "
7
179
0
14-05-2024
MySQL Database Usage & Administration PHẦN 7
37
163
0
14-05-2024
Đóng mới oto 8 chỗ ngồi part 9
10
123
0
14-05-2024
GYNECOLOGIC CANCERS IN PREGNANCY: GUIDELINES OF AN INTERNATIONAL CONSENSUS MEETING
12
97
0
14-05-2024
The Constituents of Medicinal Plants
185
104
0
14-05-2024
Giáo trình hình thành tỷ suất dinh lợi và các phương thức thanh toán nợ theo dư nợ ban đầu p3
5
95
1
14-05-2024
Giáo án điện tử tiểu học môn lịch sử: Cách mạng mùa thu
39
117
0
14-05-2024
Báo cáo y học: "Aggrecanases and cartilage matrix degradation"
10
97
0
14-05-2024
Báo cáo " Thực thi pháp luật về giao dịch bảo đảm trong hoạt động cấp tín dụng của ngân hàng thương mại - một số vướng mắc pháp lí và đề xuất hoàn thiện "
7
167
1
14-05-2024
Báo cáo " Bàn về hành vi pháp luật và hành vi đạo đức "
11
127
0
14-05-2024
TÀI LIỆU HOT
Mẫu đơn thông tin ứng viên ngân hàng VIB
8
7883
2224
Giáo trình Tư tưởng Hồ Chí Minh - Mạch Quang Thắng (Dành cho bậc ĐH - Không chuyên ngành Lý luận chính trị)
152
5988
1441
Ebook Chào con ba mẹ đã sẵn sàng
112
3780
1248
Ebook Tuyển tập đề bài và bài văn nghị luận xã hội: Phần 1
62
5385
1137
Ebook Facts and Figures – Basic reading practice: Phần 1 – Đặng Tuấn Anh (Dịch)
249
8346
1127
Giáo trình Văn hóa kinh doanh - PGS.TS. Dương Thị Liễu
561
3532
651
Tiểu luận: Tư tưởng Hồ Chí Minh về xây dựng nhà nước trong sạch vững mạnh
13
10961
531
Giáo trình Sinh lí học trẻ em: Phần 1 - TS Lê Thanh Vân
122
3728
525
Giáo trình Pháp luật đại cương: Phần 1 - NXB ĐH Sư Phạm
274
4150
523
Bài tập nhóm quản lý dự án: Dự án xây dựng quán cafe
35
4173
481
crossorigin="anonymous">
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.