tailieunhanh - CÁC ĐẶC ĐIỂM SINH HÓA CẦU KHUẨN – Phần 2

Phản ứng ONPG-aza (O-nitrophenyl-β-D-galactopyranosidase) Môi trường: ONPG Đệm phosphat 0,01M pH 7,5 Dung dịch pepton 1% (pH 7,5) 0,6 g 100 ml 300 ml. (Hoà 0,6 g ONPG trong 100 ml dung dịch đệm, khử trùng bằng màng lọc, sau đó trộn với 300 ml dung dịch pepton đã khử trùng). Bằng thao tác vô khuẩn phân môi trường vào các ống nghiệm nhỏ, bảo quản ở 4 C trong vòng 1 năm. C, 30 phút. | CÁC ĐẶC ĐIỂM SINH HÓA CẦU KHUẨN - Phần 2 . Phản ứng ONPG-aza O-nitrophenyl-P-D-galactopyranosidase Môi trường ONPG 0 6 g Đệm phosphat 0 01M pH 7 5 100 ml Dung dịch pepton 1 pH 7 5 300 ml. Hoà 0 6 g ONPG trong 100 ml dung dịch đệm khử trùng bằng màng lọc sau đó trộn với 300 ml dung dịch pepton đã khử trùng . Bằng thao tác vô khuẩn phân môi trường vào các ống nghiệm nhỏ bảo quản ở 4 C trong vòng 1 năm. Cắt những khoanh giấy lọc khử trùng 112 ũC 30 phút. Nhỏ vào mỗi khoanh giấy lọc một giọt dung dịch sau ONPG 0 06 g Nước cất 0 017 g 10 ml Làm khô ở 37 0C trong 24 giờ bảo quản trong các ống nghiệm có nút xoáy ở nhiệt độ phòng. Cấy vi khuẩn mới hoạt hoá 1 vòng que cấy vào môi trường đã chuẩn bị như trên đặt ở nhiệt độ thích hợp trong 24 giờ. Ly tâm dịch nuôi cấy thu tế bào làm dịch huyền phù đậm đặc trong 0 5 ml nước muối sinh lý. Đưa khoanh giấy ONPG vào dịch huyền phù giữ ở 35-37 0C trong 24 giờ. Quan sát kết quả màu vàng là phản ứng dương tính Escherichia coli không màu là âm tính Salmonella paratyphi B . Proteus mirabilis- ONPG ống thứ 8 âm tính Serratia marcescens- ONPG ống thứ 8 dương .