tailieunhanh - Báo cáo y học: " Polyclonal antibody against the DPV UL46M protein can be a diagnostic candidate"

Polyclonal antibody against the DPV UL46M protein can be a diagnostic candidate | Lu et al. Virology Journal 2010 7 83 http content 7 1 83 VIROLOGY JOURNAL RESEARCH Open Access Polyclonal antibody against the DPV UL46M protein can be a diagnostic candidate Liting Lu 1 Anchun Cheng 1 2 3 Mingshu Wang 1 2 Jinfeng Jiang1 Dekang Zhu1 2 Renyong Jia2 Qihui Luo2 Fei Liu2 Zhengli Chen2 Xiaoyue Chen1 2 3 and Jinlong Yang2 4 Abstract Background The duck plague virus DPV UL46 protein VP11 12 is a 739-amino acid tegument protein encoded by the UL46 gene. We analyzed the amino acid sequence of UL46 using bioinformatics tools and defined the main antigenic domains to be between nucleotides 700-2 220 in the UL46 sequence. This region was designated UL46M. The DPV UL46 and UL46M genes were both expressed in Escherichia coli Rosetta DE3 induced by isopropy1-p-D-thiogalactopyranoside IPTG following polymerase chain reaction PCR amplification and subcloning into the prokaryotic expression vector pET32a . The recombinant proteins were purified using a Ni-NTA spin column and used to generate the polyclonal antibody against UL46 and UL46M in New Zealand white rabbits. The titer was then tested using enzyme-linked immunosorbent assay ELISA and agar diffusion reaction and the specificity was tested by western blot analysis. Subsequently we established Dot-ELISA using the polyclonal antibody and applied it to DPV detection. Results In our study the DPV UL46M fusion protein with a relative molecular mass of 79 kDa was expressed in E. coli Rosetta DE3 . Expression of the full UL46 gene failed which was consistent with the results from the bioinformatic analysis. The expressed product was directly purified using Ni-NTA spin column to prepare the polyclonal antibody against UL46M. The titer of the anti-UL46M antisera was over 1 819 200 as determined by ELISA and 1 8 by agar diffusion reaction. Dot-ELISA was used to detect DPV using a 1 60 dilution of anti-UL46M IgG and a 1 5 000 dilution of horseradish peroxidase HRP -labeled goat anti-rabbit IgG. .

• Báo cáo khoa học
• báo cáo khoa học
• báo cáo y học
• công trình nghiên cứu về y học
• tài liệu về y học
• cách trình bày báo cáo
• trình bày báo cáo
• tài liệu báo cáo khoa học
• cách trình bày báo cáo khoa học
• báo cáo khoa học sinh học
• báo cáo khoa học toán học
• luận văn mẫu
• người lính việt nam
• sau chiến tranh
• tuyển tập báo cáo khoa học
• báo cáo ngành triết học
• báo cáo ngành lịch sử
• báo cáo ngành văn học
• nghiên cứu khoa học
• báo cáo về văn học
• báo cáo triết học
• báo cáo văn học
• chuyên đề văn học
• văn học nghệ thuật
• văn học Việt NAm
• báo cáo ngành toán học
• báo cáo ngành vật lý
• báo cáo ngành chăn nuôi
• văn học Trung Hoa
• báo cáo khoa học kinh tế
• Kỷ yếu tóm tắt báo cáo khoa học
• Báo cáo khoa học y học
• Hội nghị khoa học tim mạch
• Báo cáo khoa học y khoa
• Tăng huyết áp
• báo cáo sinh học
• bảo tồn nguồn gen
• báo cáo ngành kỹ thuật
• Báo cáo quản lý chất thải sinh hoạt
• Báo cáo khoa học môi trường
• Báo cáo khoa học công nghệ
• Nghiên cứu khoa học về môi trường
• Đề tài nghiên cứu khoa học
• Báo cáo nghiên cứu khoa học