tailieunhanh - KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 10

161 2. Phương pháp mẫu dò lạnh (cold probe) Trước đây các phương pháp lai đều sử dụng mẫu dò đánh dấu phóng xạ. Về sau thay vì chế tác và sử dụng những mẫu dò phóng xạ người ta kết hợp kháng thể với enzyme và lợi dụng hoạt tính của enzyme để phát màu cơ chất giúp phát hiện băng đặc hiệu, được gọi là phương pháp mẫu dò lạnh. Nhìn chung phương pháp sử dụng mẫu dò lạnh có độ phiền phức và mất thời gian tương tự phương pháp sử dụng mẫu dò phóng xạ | 1 6 1 2. Phương pháp mẫu dò lạnh cold probe Trước đây các phương pháp lai đều sử dụng mẫu dò đánh dấu phóng xạ. Về sau thay vì chế tác và sử dụng những mẫu dò phóng xạ người ta kết hợp kháng thể với enzyme và lợi dụng hoạt tính của enzyme để phát màu cơ chất giúp phát hiện băng đặc hiệu được gọi là phương pháp mẫu dò lạnh. Nhìn chung phương pháp sử dụng mẫu dò lạnh có độ phiền phức và mất thời gian tương tự phương pháp sử dụng mẫu dò phóng xạ. Trong trường hợp này tính bổ sung giữa mẫu dò với DNA tế bào trở nên giảm nên các bước rửa cần phải nhẹ nhàng. Nếu sử dụng các mẫu dò phóng xạ thì việc kiểm tra chất lượng nền trong quá trình rửa thực hiện được nhờ máy đo phóng xạ rất dễ dàng và nếu rửa chưa đủ nên nền còn độ phóng xạ cao thì tiếp tục rửa cho đến khi nền giảm xạ. Phương pháp mẫu dò lạnh không có ưu điểm này phải thực hiện chọn đến khi phát màu. Ví dụ dưới đây mô tả phương pháp mẫu dò lạnh với probe của hãng Amersham Life Science gọi là phương pháp ECL. 1 6 2 cặp băng chung bố và con cặp băng chung mẹ và con cặp băng chung bố và con Hình 17 Kết quả xét nghiệm DNA finger print xác nhận huyết thống tìm bố sinh học cho con Làn 1 DNA bố hộ tịch làn 2 DNA bố sinh học làn 3 DNA của con và 4 DNA của mẹ. Con và mẹ cũng như con và bố sinh học có các băng giống nhau. Trong trường hợp này probe được kết hợp trực tiếp với enzyme và kiểm xuất trên film sự phát huỳnh quang của tổ hợp do phản ứng hóa học phát ra. Thời gian lộ quang khoảng 1 giờ trong lúc này một tấm Hyperfilm được đặt ép lên màng Saran wrap phủ trên màng đang phản ứng sau đó rửa film và đọc kết quả. Phương pháp này đơn giản thực hiện và đọc thuyết minh một cách dễ dàng. Người ta cũng đã sử dụng vào việc giám biệt quan hệ huyết thống tìm bố thực hay bố sinh học cho con. . Từ các làn DNA của hai người bố cũng như của người mẹ có khoảng 10 băng nhìn thấy rõ và 5 - 6 băng mờ hơn. Trong các băng đó có khá nhiều băng có sự khác biệt về độ lớn nhờ vậy hình thành dấu vân tay DNA rất riêng biệt của cá thể. Có thể .

• Sinh học
• sinh hoc phân tử
• giáo trình sinh hoc phân tử
• tài liệu sinh hoc phân tử
• bài giảng sinh hoc phân tử
• đề cương sinh hoc phân tử
• Sinh học phân tử
• Giáo trình sinh học phân tử
• Tài liệu sinh học phân tử
• Công nghệ sinh học phân tử
• Ứng dụng sinh học phân tử
• Phân loại sinh học phân tử
• Thí nghiệm sinh học phân tử
• Bài tập sinh học phân tử
• Bài giảng Sinh học ph ân tử
• Chủng vi sinh vật
• Phương pháp sinh học phân tử
• Kỹ thuật sinh học phân tử
• Ứng dựng sinh học phân tử
• bài giảng sinh học phân tử
• lý thuyết sinh học phân tử
• quả trình sinh học phân tử
• Lược sử phát triển sinh học phân tử
• Nhập môn sinh học phân tử
• Phương pháp Lược sử phát triển sinh học phân tử