tailieunhanh - KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 7

Hình 11: Kết quả giải trình gen trên máy tự động. Thông tin được ghi và lưu lại dưới dạng các băng DNA có màu huỳnh quang khác nhau, dưới dạng sóng và trình tự nucleotide. 5) Sau khi chuẩn bị gel, kiểm tra kết nối máy điện di với máy vi tính, thiết định protocol và thư mục về mẫu rồi điện di tiền khởi để kiểm tra độ sạch của bản gel (chủ yếu là bề ngoài tấm thủy tinh vùng quỹ đạo của đầu dò đọc huỳnh quang, nếu chưa sạch phải lau lại bằng isopropyl alcohol). 6) Xử. | 107 pipet hoặc đổ bỏ cũng được tráng nhẹ tủa bằng 250 pl ethanol 75 rồi loại bỏ hoàn toàn lớp ethanol tránh quấy vào tủa không thể nhìn thấy làm khô. Hình 11 Kết quả giải trình gen trên máy tự động. Thông tin được ghi và lưu lại dưới dạng các băng DNA có màu huỳnh quang khác nhau dưới dạng sóng và trình tự nucleotide. 5 Sau khi chuẩn bị gel kiểm tra kết nối máy điện di với máy vi tính thiết định protocol và thư mục về mẫu rồi điện di tiền khởi để kiểm tra độ sạch của bản gel chủ yếu là bề ngoài tấm thủy tinh vùng quỹ đạo của đầu dò đọc huỳnh quang nếu chưa sạch phải lau lại bằng isopropyl alcohol . 6 Xử lý dịch màu trộn formamide chuẩn bị trước dung dịch loading 108 buffer bằng cách trộn formamide khử ion và EDTE pH 8 0 25mM chứa với tỷ lệ formamide EDTA-Blue dextran là 5 1 . Cho vào ống chứa sản phẩm phản ứng sạch nêu trên 4 - 6 pl dịch màu formamide trộn xoáy và li tâm tập trung. 7 Xử lý nhiệt đưa vào nước sôi 1 phút rồi đưa nhanh về nước đá đang tan cho đến khi tải mẫu . 8 Tải vào gel polyacrylamide-urea đã ráp trong máy Sequencer tự động như trình bày ở trên. Thể tích mẫu cần tải thường là 4 - 6 pl. Kiểm tra chế độ đọc và lưu thông tin trên máy tính kết nối với máy Sequencer. Chú ý trong nhiều trường hợp tải mẫu ở các giếng gel kế tiếp nhau có thể dẫn đến hiện tượng nhiễu thông tin do có sự giao thoa giữa các làn kề nhau khi đó tải gel cách giếng làm giảm hiện tượng này. Nếu cần tải tất cả các giếng thì nên tải hai lần. Lần đầu tải dịch phản ứng vào các lỗ giếng cách khoảng điện di 10 phút rồi tắt máy mở nắp thì máy tự động dừng và tải mẫu vào các giếng xen kẽ còn lại. 9 Cho máy chạy 10 giờ qua đêm . Các thiết bị Sequencer tự động sẽ tự động dò đọc sự dịch chuyển của các đoạn DNA trong gel một cách định kỳ một số lần trong 1 phút tùy thiết kế trên một lộ tuyến cắt ngang đường dịch chuyển của DNA và lưu giữ thông tin cho việc phân tích kết quả cũng như biên tập edit kết quả trên máy vi tính. Với cách kiểm tra thực thời này thì các mảnh DNA có khối lượng phân tử

• Sinh học
• sinh hoc phân tử
• giáo trình sinh hoc phân tử
• tài liệu sinh hoc phân tử
• bài giảng sinh hoc phân tử
• đề cương sinh hoc phân tử
• Sinh học phân tử
• Giáo trình sinh học phân tử
• Tài liệu sinh học phân tử
• Công nghệ sinh học phân tử
• Ứng dụng sinh học phân tử
• Phân loại sinh học phân tử
• Thí nghiệm sinh học phân tử
• Bài tập sinh học phân tử
• Bài giảng Sinh học ph ân tử
• Chủng vi sinh vật
• Phương pháp sinh học phân tử
• Kỹ thuật sinh học phân tử
• Ứng dựng sinh học phân tử
• bài giảng sinh học phân tử
• lý thuyết sinh học phân tử
• quả trình sinh học phân tử
• Lược sử phát triển sinh học phân tử
• Nhập môn sinh học phân tử
• Phương pháp Lược sử phát triển sinh học phân tử