Kinh doanh - Marketing
Kinh tế quản lý
Biểu mẫu - Văn bản
Tài chính - Ngân hàng
Công nghệ thông tin
Tiếng anh ngoại ngữ
Kĩ thuật công nghệ
Khoa học tự nhiên
Khoa học xã hội
Văn hóa nghệ thuật
Sức khỏe - Y tế
Văn bản luật
Nông Lâm Ngư
Kỹ năng mềm
Luận văn - Báo cáo
Giải trí - Thư giãn
Tài liệu phổ thông
Văn mẫu
Giới thiệu
Đăng ký
Đăng nhập
Tìm
Danh mục
Kinh doanh - Marketing
Kinh tế quản lý
Biểu mẫu - Văn bản
Tài chính - Ngân hàng
Công nghệ thông tin
Tiếng anh ngoại ngữ
Kĩ thuật công nghệ
Khoa học tự nhiên
Khoa học xã hội
Văn hóa nghệ thuật
Y tế sức khỏe
Văn bản luật
Nông lâm ngư
Kĩ năng mềm
Luận văn - Báo cáo
Giải trí - Thư giãn
Tài liệu phổ thông
Văn mẫu
Thông tin
Điều khoản sử dụng
Quy định bảo mật
Quy chế hoạt động
Chính sách bản quyền
Giới thiệu
Đăng ký
Đăng nhập
0
Trang chủ
Khoa Học Tự Nhiên
Sinh học
KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 6
tailieunhanh - KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 6
89 Dung dịch hybridization chứa 1,5 ml NaCl 5M, 0,1 ml Tris-HCl 2M (pH 8,0), 0,05 ml EDTA 0,5M, 1 ml dung dịch Denhardt 10×, 1ml SDS 10%, 0,5 ml DNA cá hồi đã biến tính 1 mg/ml và mẫu dò đánh dấu bằng 32P đã biến tính 1 - 3×107 cpm, tổng 10 ml. Dung dịch Denhardt 10× chứa 2% BSA fraction V, 2% polyvinyl pyrrolidone và 2% ficoll 400 (Pharmacia); sử dụng BSA thường gặp nấm mốc nên khi dùng mới pha, bảo quản ở tủ lạnh chỉ được 1 tháng. Chú ý: Một số màng lọc như. | 89 Dung dịch hybridization chứa 1 5 ml NaCl 5M 0 1 ml Tris-HCl 2M pH 8 0 0 05 ml EDTA 0 5M 1 ml dung dịch Denhardt 10 1ml SDS 10 0 5 ml DNA cá hồi đã biến tính 1 mg ml và mẫu dò đánh dấu bằng 32P đã biến tính 1 - 3 107 cpm tổng 10 ml. Dung dịch Denhardt 10X chứa 2 BSA fraction V 2 polyvinyl pyrrolidone và 2 ficoll 400 Pharmacia sử dụng BSA thường gặp nấm mốc nên khi dùng mới pha bảo quản ở tủ lạnh chỉ được 1 tháng. Chú ý Một số màng lọc như Gene Screen Plus. cần phải lai tiền khởi prehybridization 8 giờ. Có thể tái sử dụng màng lọc nylon như Nitran của S S. khi đó ngâm màng trong NaOH 0 2N ở nhiệt phòng trong 2 giờ loại bỏ mẫu dò không có tương tác bổ sung rửa nước cho sạch rồi trung hòa bằng dung dịch chứa 0 2 M Tris-HCl pH 7 2 và 0 1 SDS. Ngâm trong túi polyethylene chứa dung dịch prehybridization trong 2 giờ ở 65 phút rồi bảo quản ở tủ lạnh bảo quản được lâu trong buồng lạnh sâu. Khi dùng lấy ra cho ấm ở 65 C rồi thực hiện từ bước lai hybridization . 3. Lai gel khô Do thiết bị tổng hợp DNA ngày càng phổ biến việc sử dụng DNA tổng hợp làm mẫu dò cho lai Southern ngày càng trở nên có thể. Trong những trường hợp đó không cần sử dụng màng mà có thể sử dụng gel trực tiếp để lai với cảm độ cao và ngày càng trở nên phổ biến. Các bước có thể tiến hành như sau 1 Chế gel agarose 1 thông thường 0 6 - 8 . Khi đó đổ lớp gel hơi mỏng hơn thông thường ít nhiều chỉ khoảng 3 - 5 mm . Điện di với điện áp cao hơn hay thời gian kéo dài hơn so với gel có nồng độ agarose thấp hơn xử lý kiềm và trung hòa gần giống như đối với màng nitrocellulose hay màng nylon. -Xử lý kiềm NaOH 0 5N - NaCl 0 15M nhiệt độ phòng 30 phút -Trung hòa Tris pH 7 0 0 5M - NaCl 0 15M nhiệt độ phòng 30 phút. 2 Sau khi điện di nhuộm ethidium bromide chụp ảnh lưu tư liệu nếu cần. Tuy nhiên nếu khi điện di đã cho DNA MW marker phóng xạ như 32P -DNA đã tiêu hóa bằng Hind III rồi thì bỏ qua bước chụp ảnh. 90 3 Đặt tấm gel trên 2 tấm giấy lọc 3MM đậy phía trên bằng một tấm Saran wrap tờ giấy bọc mỏng bằng chất dẻo .
Việt Phong
72
18
pdf
Báo lỗi
Trùng lắp nội dung
Văn hóa đồi trụy
Phản động
Bản quyền
File lỗi
Khác
Upload
Tải xuống
đang nạp các trang xem trước
Bấm vào đây để xem trước nội dung
Tải xuống
TÀI LIỆU LIÊN QUAN
Phân loại Sinh học phân tử - TS Nguyễn Trung Thành
61
249
12
Đề tài: Sinh học phân tử cao học
19
182
3
Liên kết hóa học của đại sinh học phân tử
54
132
1
Chủ thuyết trung tâm của sinh học phân tử
23
138
4
Bài giảng Sinh học phân tử
7
154
6
Giáo trình Kỹ thuật cơ bản trong Sinh học phân tử - TS. Phạm Hồng Sơn
172
221
15
Bài giảng sinh học phân tử - ThS Nguyễn Khánh Linh
188
170
6
Ebook Cơ sở và phương pháp sinh học phân tử - Chu Hoàng Mậu
151
156
10
Bài thuyết trình môn Sinh học phân tử - Chuyên đề: SiARN Gene Silencing
36
174
4
Giáo trình sinh học phân tử màng tế bào - GS.TS Đỗ Ngọc Liên
173
238
14
TÀI LIỆU XEM NHIỀU
Một Case Về Hematology (1)
8
461870
55
Giới thiệu :Lập trình mã nguồn mở
14
22661
59
Tiểu luận: Tư tưởng Hồ Chí Minh về xây dựng nhà nước trong sạch vững mạnh
13
10897
529
Câu hỏi và đáp án bài tập tình huống Quản trị học
14
10069
446
Phân tích và làm rõ ý kiến sau: “Bài thơ Tự tình II vừa nói lên bi kịch duyên phận vừa cho thấy khát vọng sống, khát vọng hạnh phúc của Hồ Xuân Hương”
3
9525
104
Ebook Facts and Figures – Basic reading practice: Phần 1 – Đặng Tuấn Anh (Dịch)
249
8293
1125
Tiểu luận: Nội dung tư tưởng Hồ Chí Minh về đạo đức
16
8242
423
Mẫu đơn thông tin ứng viên ngân hàng VIB
8
7865
2220
Đề tài: Dự án kinh doanh thời trang quần áo nữ
17
6691
253
Vật lý hạt cơ bản (1)
29
5774
85
TỪ KHÓA LIÊN QUAN
Sinh học
sinh hoc phân tử
giáo trình sinh hoc phân tử
tài liệu sinh hoc phân tử
bài giảng sinh hoc phân tử
đề cương sinh hoc phân tử
Sinh học phân tử
Giáo trình sinh học phân tử
Tài liệu sinh học phân tử
Công nghệ sinh học phân tử
Ứng dụng sinh học phân tử
Phân loại sinh học phân tử
Thí nghiệm sinh học phân tử
Bài tập sinh học phân tử
Bài giảng Sinh học ph ân tử
Chủng vi sinh vật
Phương pháp sinh học phân tử
Kỹ thuật sinh học phân tử
Ứng dựng sinh học phân tử
bài giảng sinh học phân tử
lý thuyết sinh học phân tử
quả trình sinh học phân tử
Lược sử phát triển sinh học phân tử
Nhập môn sinh học phân tử
Phương pháp Lược sử phát triển sinh học phân tử
TÀI LIỆU MỚI ĐĂNG
Sáng tạo trong thuật toán và lập trình với ngôn ngữ Pascal và C# Tập 2 - Chương 4
47
246
1
28-04-2024
Bibliography on Medieval Women, Gender, and Medicine 1980-2009
82
210
0
28-04-2024
Magnetic Bearings Theory and Applications phần 2
14
172
0
28-04-2024
MySQL Basics for Visual Learners PHẦN 9
15
184
0
28-04-2024
B2B Content Marketing: 2012 Benchmarks, Budgets & Trends
17
139
0
28-04-2024
Khurana et al. Journal of Orthopaedic Surgery and Research 2010, 5:23
7
134
0
28-04-2024
Khóa luận tốt nghiệp: Giải pháp nâng cao chất lượng phương thức thanh toán tín dụng chứng từ phục vụ xuất nhập khẩu tại ngân hàng Thương mại Việt Nam - Trần Thị Tân
12
118
0
28-04-2024
Chương 10: Các phương pháp tính quá trình quá độ trong mạch điện tuyến tính
57
179
4
28-04-2024
ĐỀ ÔN TẬP THI ĐH & CĐ NĂM 2011 MÔN VẬT LÍ
6
90
0
28-04-2024
Giáo án điện tử tiểu học môn lịch sử: Cách mạng mùa thu
39
113
0
28-04-2024
TÀI LIỆU HOT
Mẫu đơn thông tin ứng viên ngân hàng VIB
8
7865
2220
Giáo trình Tư tưởng Hồ Chí Minh - Mạch Quang Thắng (Dành cho bậc ĐH - Không chuyên ngành Lý luận chính trị)
152
5752
1381
Ebook Chào con ba mẹ đã sẵn sàng
112
3769
1231
Ebook Tuyển tập đề bài và bài văn nghị luận xã hội: Phần 1
62
5325
1136
Ebook Facts and Figures – Basic reading practice: Phần 1 – Đặng Tuấn Anh (Dịch)
249
8293
1125
Giáo trình Văn hóa kinh doanh - PGS.TS. Dương Thị Liễu
561
3502
643
Tiểu luận: Tư tưởng Hồ Chí Minh về xây dựng nhà nước trong sạch vững mạnh
13
10897
529
Giáo trình Sinh lí học trẻ em: Phần 1 - TS Lê Thanh Vân
122
3687
525
Giáo trình Pháp luật đại cương: Phần 1 - NXB ĐH Sư Phạm
274
4055
516
Bài tập nhóm quản lý dự án: Dự án xây dựng quán cafe
35
4132
480
crossorigin="anonymous">
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.