tailieunhanh - THIẾT KẾ TRÌNH TỰ MỒI TRONG PHẢN ỨNG PCR BẰNG FASTPCR VÀ DNA CLUB

Mục tiêu của bài học: Thiết kế được những trình tự primer cho những trình tự DNA khuôn (vi sinh vật, virus và các động vật khác); phân tích được những thông số của primer qua các phần mềm. PCR là một kỹ thuật duy nhất để khuếch đại một mẫu DNA mong muốn khuếch đại( ví dụ những đoạn gene của vi sinh vật, vi khuẩn hay những đoạn gene của người và những động vật khác). | THIẾT KẾ TRÌNH TỰ MỒI TRONG PHẢN ỨNG PCR BẰNG FASTPCR VÀ DNA CLUB Mục tiêu của bài học Thiết kế được những trình tự primer cho những trình tự DNA khuôn (vi sinh vật, virus và các động vật khác) Phân tích được những thông số của primer qua các phần mềm Tìm kiếm trình tự sinh học Quá trình sao chép DNA trong tế bào Giới thiệu môn học Qui trình phản ứng PCR Giới thiệu môn học Các vi sinh vật, động vật Thu nhận mẫu Kỹ thuật PCR lần đầu tiên được Mullis và cộng sự mô tả vào năm 1986 và cũng do chính phát minh này Mullis đã được trao giải nobel vào năm 1993 Thành phần trong phản ứng PCR Phản ứng PCR được thực hiện khi có: DNA mẫu Primers (mồi xuôi và ngược dài khoảng 18-30 bp không bắt cặp bổ sung ) Taq polymerase ( emzyme chịu nhiệt tách từ vi khuẩn suối mước nóng Thermus aquaticus ) 4 loại deoxiribomucleotid triphọtphat (dATP , dCTP, dTTP , dGTP) , Dung dịch đệm và Mg2+ Giới thiệu môn học MÁY PCR Giới thiệu môn học PCR là một kỹ thuật duy nhất để . | THIẾT KẾ TRÌNH TỰ MỒI TRONG PHẢN ỨNG PCR BẰNG FASTPCR VÀ DNA CLUB Mục tiêu của bài học Thiết kế được những trình tự primer cho những trình tự DNA khuôn (vi sinh vật, virus và các động vật khác) Phân tích được những thông số của primer qua các phần mềm Tìm kiếm trình tự sinh học Quá trình sao chép DNA trong tế bào Giới thiệu môn học Qui trình phản ứng PCR Giới thiệu môn học Các vi sinh vật, động vật Thu nhận mẫu Kỹ thuật PCR lần đầu tiên được Mullis và cộng sự mô tả vào năm 1986 và cũng do chính phát minh này Mullis đã được trao giải nobel vào năm 1993 Thành phần trong phản ứng PCR Phản ứng PCR được thực hiện khi có: DNA mẫu Primers (mồi xuôi và ngược dài khoảng 18-30 bp không bắt cặp bổ sung ) Taq polymerase ( emzyme chịu nhiệt tách từ vi khuẩn suối mước nóng Thermus aquaticus ) 4 loại deoxiribomucleotid triphọtphat (dATP , dCTP, dTTP , dGTP) , Dung dịch đệm và Mg2+ Giới thiệu môn học MÁY PCR Giới thiệu môn học PCR là một kỹ thuật duy nhất để khuếch đại một mẫu DNA mong muốn khuếch đại (ví dụ những đoạn gene của vi sinh vật, vi khuẩn hay những đoạn gene của người và những động vật khác) Nguyên tắc trong phản ứng PCR Giới thiệu môn học Biến tính Bắt cặp Kéo dài Nguyên tắc trong phản ứng PCR Giới thiệu môn học Phản ứng PCR gồm có 3 giai đoạn: • Biến tính DNA mẫu T=940C • Bắt cặp mồi Tm = 550C-650C • Giai đoạn kéo dài, tổng hợp DNA mới T kéo dài =700C Mục đích, nguyên tắc Mồi là những đoạn nucleotide ngắn, bắt cặp bổ sung với đầu 5' hay đầu 3' của mạch DNA khuôn mẫu. Mồi được thiết kế dựa vào 2 vùng trình tự đã được biết, nằm ở hai đầu của đoạn gen cần khuếch đại. Giới thiệu môn học Forward primer Reverse primer Đoạn DNA cần khuếch đại Primer là gì? Primer là một đoạn ngắn oligonucleotide nó là khả năng bắt cặp bổ sung với DNA khuôn Primer sẽ bắt cặp với đoạn DNA khuôn (DNA mục tiêu) cần khuếch đại số lượng lớn DNA Tìm kiếm trình tự sinh học Đặc tính của primer 1. Tính chuyên biệt 2. Tính